达托霉素产生菌玫瑰孢链霉菌SWU2010遗传转化体系的建立和优化

来源 :2012年第五届全国微生物遗传学学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yjs001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  目的:对玫瑰孢链霉菌(Streptomyces roseosporus)中的功能基因进行研究,构建达托霉素高产菌株。方法:分别以基因整合型质粒pSETl52和自主复制质粒pKC1139为出发质粒,E.coli ET12567(PUZ8002,pSETl52/pKC1139)为供体,S.roseosporus SWU2010孢宇为受体,选择MS、AS-1、TSB琼脂培养基作为接合转移的培养基进行试验。结果:AS-培养基是接合转移的最佳培养基。孢子的预萌发条件为50℃热激lOmin,转化效率达10-6~10-3,抗生素1618h覆盖效果最好。结论:探索了玫瑰孢链霉菌的接合转移系统,确定了玫瑰孢链霉菌的最佳接合转移条件,并利用己建立好的接合转移的体系实现了安普霉素抗性基因的特异性敲除,为实现基因工程菌株的构建和提高玫瑰孢链霉菌的产抗能力奠定了重要基础。
其他文献
  最近几年,食品冷藏链的重要性被提到前所未有的高度。研发食品冷藏链新技术追在眉睫。根据减压冷藏设备与保鲜技术的若干研究与实践成果,探讨在传统食品冷藏链基础上构建一
  采用菠菜为试材,研究不同RH对其失水率的影响程度,结合菠菜的比表面积,找出菠菜在储存过程中水分含量的变化与比表面积的关系,旨在为菠菜的保鲜研究提供理论依据.实验表明相
In recent decades,a few Godunov-type,finite volume two-dimensional (2D) unstructured grid,coupled flow,and sediment models (GF2DUCM) have been developed for flo
  冰温技术已经得到广泛应用,被认为是一项值得推广的食品贮存技术。但由于冰温带范围较小,并处于食品冰点附近,实际应用中较难控制温度的稳定性,而温度的波动对冷冻食品贮存质
通过对210例孕妇及其所生婴儿的调查证明:孕妇血清钙离子浓度自妊娠早期开始下降,有些病例降至正常值以下。母血钙低于正常的现象出现越早,所生婴儿出现佝偻病的时间也越早;
为探讨炭黑尘肺的发病规律,我们对抚顺炭黑股份有限公司1988~1994年历年累积的68例炭黑尘肺病例的有关资料进行了分析。 To investigate the incidence of carbon black pne
The valorization solutions for dredged sediment have been the subject of a great number of investigations over the previous decades.In the current present study
  目的:通过克隆表达和敲除编码犬尿氨酸酶的kyn基因,考察此途径中犬尿氨途径对达托霉素生物合成的影响。方法:将kyn和pET23b载体用NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后连接,化入E.coil BL21(
  目的:在玫瑰孢链霉菌中克隆出dptJ基因并进行异源表达和酶活测定。方法:将dptJ基因从Streptomyces roseosporus基因组中克隆出来,然后利用PET23b载体转入BL21(DE3)中,利用IPT
  本文拟采用基因分子进化的策略,采用一个新的基于核酸内切酶(endoY)的方法对编码成熟肤的DHAP基因片段进行了突变和DNA改组,进一步筛选获得催化性能更加优良的新型脱毛蛋白