【摘 要】
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目的:观察MSP58(58-kDa Microspherule protein,核微球蛋白58)基因特异性siRNA(small interfering RNA)对神经胶质瘤U251细胞的体外增殖和凋亡的影响。方法:体外化学合成针对MSP58基因的siRNA,脂质体法转染神经胶质瘤细胞系U251,荧光显微镜观察转染效率,逆转录酶-多聚酶链反应(Reversetranscriptase-polyme
【机 构】
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第四军医大学西京脑科医院神经外科,陕西 西安 710032 第四军医大学基础部生物化学与分子生物学
【出 处】
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中国抗癌协会神经肿瘤专业委员会第六届学术大会暨第三届韩-中神经肿瘤双边学术交流会议
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目的:观察MSP58(58-kDa Microspherule protein,核微球蛋白58)基因特异性siRNA(small interfering RNA)对神经胶质瘤U251细胞的体外增殖和凋亡的影响。
方法:体外化学合成针对MSP58基因的siRNA,脂质体法转染神经胶质瘤细胞系U251,荧光显微镜观察转染效率,逆转录酶-多聚酶链反应(Reversetranscriptase-polymerase chainreaction,RT-PCR)和Western blot分别检测MSP58基因的mRNA和蛋白表达水平,四唑兰显色法(methyl thiazolyl tetrazolium assay,MTT法)绘制细胞生长曲线,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期和细胞凋亡。
结果:MSP58基因的特异性siRNA转染U251细胞后,MSP58的mRNA和蛋白表达水平明显降低,细胞增殖受到明显抑制;流式绌胞仪检测显示转染后的U251细胞G2/M期细胞明显减少(P<0.01),S期细胞略有减少,G1期细胞明显增加(P<0.01),G1期发生明显阻滞;细胞凋亡无明显变化,未出现凋亡。
结论:MSP58基因的特异性siRNA可明显抑制神经胶质瘤细胞U251的增殖,并引起G1期细胞阻滞,但对细胞凋亡没有明显影响。
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