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目的 染料木黄酮能够有效抑制乳腺癌细胞的增殖。流行病学调查显示,女性不同时期食用大豆及其制品对乳腺癌的预防效果不同,染料木黄酮对绝经前的妇女有更强的保护作用,这可能与绝经前妇女体内雌激素水平较高有关。本实验主要研究不同雌二醇水平条件下,染料木黄酮对乳腺癌细胞MDA-MB-231 细胞增殖抑制作用的差异,进而探讨不同雌二醇水平对乳腺癌细胞MDA-MB-231 细胞周期、细胞凋亡、EGFR基因和PTEN 基因表达影响。方法 本研究雌二醇设计0pmol/L、80pmol/L、800pmol/L、1000pmol/L、1600pmol/L 共5 个水平,每个雌二醇水平对应设计染料木黄酮浓度为0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L,用含相应受试物的培养基培养乳腺癌MDA-MB-231 细胞96 小时后,经MTT 法检测细胞吸光度值,并计算细胞增殖抑制率。染料木黄酮浓度为20μmol/L 时,应用流式细胞术探讨不同雌二醇水平对细胞周期、细胞凋亡影响的差异。以ACBT 内参基因,应用实时定量PCR 技术检测不同雌二醇水平对乳腺癌细胞MDA-MB-231EGFR 基因和PTEN 基因的影响。结果 雌二醇水平为0pmol/L、80pmol/L 时,染料木黄酮20μmol/L 能够对乳腺癌细胞MDA-MB-231 增殖产生明显的抑制作用；雌二醇水平为800pmol/L、1000pmol/L 以及1000pmol/L 时,染料木黄酮10μmol/L 能够对乳腺癌细胞MDA-MB-231 增殖产生明显的抑制作用。流式细胞术检测发现,在染料木黄酮有效剂量下,细胞周期主要阻滞在G0/G1 期,且随雌二醇水平的升高阻滞在G0/G1 期的细胞数量和细胞凋亡比例增大。实时定量PCR 技术显示,EGFR 基因在有雌二醇水平的条件下表达会下调,雌二醇水平为80pmol/L EGFR 基因下调最为明显；PTEN 基因的表达量会随雌二醇水平浓度的升高而升高,雌二醇水平为800pmol/L PTEN 基因上调表达的表达量最高。染料木黄酮对乳腺癌细胞MDA-MB-231 增殖的抑制作用、细胞周期阻滞、细胞凋亡情况、EGFR 基因和PTEN 基因的表达的影响会因雌二醇水平的不同而有所差异。雌二醇水平为800pmol/L(相当于绝经前水平)时,染料木黄酮使细胞增殖明显受到抑制作用的浓度较低；染料木黄酮在同一有效浓度下,雌二醇水平为800pmol/L 时,细胞G0/G1 期的阻滞作用较强、凋亡比例较大,对PTEN 基因表达量上调作用较强,而雌二醇水平为80pmol/L(相当于绝经后水平)对EGFR 基因表达上调作用较强。结论 雌二醇水平较低时,染料木黄酮对乳腺癌细胞的抗癌作用所需剂量较高；雌二醇水平较高时,染料木黄酮在较低剂量下能更有效地控制细胞增殖、抑制细胞周期、促进原癌基因下调和抑癌基因上调,从而发挥对乳腺癌细胞的抗癌作用。