【摘 要】
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目的：在比格犬下丘脑-垂体-性腺轴上筛查雌激素受体β的剪接异构体. 方法：针对ERβmRNACDS序列的八个外显子,两两外显子依次组合设计引物,运用PCR法,以比格犬下丘脑、垂体、
【机 构】
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军事医学科学院实验动物中心,北京 100071
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目的：在比格犬下丘脑-垂体-性腺轴上筛查雌激素受体β的剪接异构体.
方法：针对ERβmRNACDS序列的八个外显子,两两外显子依次组合设计引物,运用PCR法,以比格犬下丘脑、垂体、卵巢、子宫组织cDNA为模板扩增相应序列,测序后在NCBI网站比对,确定是目的基因后,用DNAMAN软件比对分析及手工校对,获得ERβ的剪接异构体.
结果：获得到了比格犬Erβ的四个剪接异构体,分别是第4外显子完整缺失的Erβ剪接异构体(缺失300bp),部分第4与部分第5外显子组合缺失的两个组合型缺失的Erβ剪接异构体(各缺失334bp,265bp),以及第七外显子完整缺失的Erβ剪接异构体(缺失181bp).第4外显子完整缺失的剪接异构体和第7外显子完整缺失的剪接异构体获得了全长编码序列,另两个剪接异构体为部分编码序列.
结论：研究获得了比格犬Erβ的四个剪接异构体,为后续研究其在比格犬生殖调控中的作用机制打下了基础.
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