【摘 要】
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目的 发现先天性白内障家系中的致病基因突变,为基因诊断和遗传咨询提供依据.方法 收集1个先天性白内障家系,排除眼部和全身其他遗传性疾病,对所有家系成员眼前节散瞳检查,并对先证者进行表型认定,绘制家系系谱图.经知情同意后,采集先证者及家系成员外周血白细胞基因组DNA.选取先天性白内障已知候选基因CRYAB、CHMP4B、PITX3、CR YAA、CRYBB1、EPHA2、PAX6、AQP0、C-MA
【机 构】
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中国医学科学院基础医学研究所医学遗传学系 中国医科大学盛京医院
【出 处】
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中华医学会2012年医学遗传学年会暨全国第十一次医学遗传学学术会议
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目的 发现先天性白内障家系中的致病基因突变,为基因诊断和遗传咨询提供依据.方法 收集1个先天性白内障家系,排除眼部和全身其他遗传性疾病,对所有家系成员眼前节散瞳检查,并对先证者进行表型认定,绘制家系系谱图.经知情同意后,采集先证者及家系成员外周血白细胞基因组DNA.选取先天性白内障已知候选基因CRYAB、CHMP4B、PITX3、CR YAA、CRYBB1、EPHA2、PAX6、AQP0、C-MAF、ITM2B、BEST1,对其外显子及外显子-内含子交界进行PCR测序.对可疑变异在家系中进行共分离验证,然后在正常人群中进行验证.对可疑变异进行生物信息学分析并结合EGFP报告基因对其功能进行初步分析.结果 测序结果显示,先证者及其受累母亲C-MAF(NM_001031804.2)基因的3UTR区1678位胸腺嘧啶替换为胞嘧啶(c.+1678T＞C),而表型正常的父亲无此改变.在90例正常对照中没有发现此变异,并且dbSNP数据库,HGMD数据库,Uniprot数据库等数据库中均无报道.C-MAF(NM_001031804.2)c.+1678T在物种间高度保守；EST数据显示变异附近的保守区可以转录；TargetScan预测此变异位于hsa-miR-382的LOOP域的RNA结合区.C-MAF(NM_001031804.2)3UTR全长野生型报告基因和突变型报告基因之间及其分别与hsa-miR-382共转染对报告基因EGFP荧光强度和蛋白表达量没有明显影响.融合了C-MAF(NM_001031804.2)基因3UTR的5端报告基因的载体表达EGFP荧光强度明显强于融合其3UTR全长报告基因的荧光强度.转录本分析发现,C-MAF基因的转录本NM 001031804.2在人晶状体上皮细胞中几乎没有表达,而在HEK293T细胞中表达较强.结论 C-MAF(NM_001031804.2)基因可能不是hsa-miR-382的靶基因,其3UTR的3非保守端可能存在抑制蛋白表达的元件.C-MAF(NM_001031804.2)基因很可能在晶状体纤维细胞中表达,而在晶状体上皮细胞中不表达或者仅在特定发育阶段表达.因此C-MAF(NM_001031804.2)基因3UTR(c.+1678T＞C)突变的致病性还有待深入研究.
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