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本文以绿色未成熟、转色初熟、红色成熟、暗红色完熟“荸荠”杨梅果实为试材,应用改良Bugos法提取总RNA,应用polyAT技术分离纯化mRNA,利用LD-PCR技术合成cDNA,经Sfi 1酶切后克隆入pDNR-LIB载体,成功构建了杨梅四个成熟度果实的cDNA文库。文库滴度均达到高质量cDNA文库的滴度标准(10的5次方cfu/ml)。PCR鉴定和测序分析结果表明,文库中杨梅cDNA的插入长度分布范围以300-1000bp为主,占总EST(表达序列标签)数量的92.25%。并分别从四个cDNA文库随机挑取500个克隆进行测序,共获得2000个EST序列,分析表明,共产生395个单基因簇(Unigene)序列,包括301个Singleton(单条序列产生的簇)和94个TCs。