【摘 要】
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目的：研究肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导人肾小球系膜细胞(HMCs)1,4,5-三磷酸肌醇Ⅰ型受体(IP3R1)的表达及并探讨细胞内丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族各亚类信号转导通路和肿
【机 构】
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江西省九江市第一人民医院消化内科332000中国医科大学附属院一院传染科
【出 处】
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第四届慢性乙型肝炎抗病毒治疗难点和热点学术会议
论文部分内容阅读
目的：研究肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导人肾小球系膜细胞(HMCs)1,4,5-三磷酸肌醇Ⅰ型受体(IP3R1)的表达及并探讨细胞内丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族各亚类信号转导通路和肿瘤坏死因子受体(TNFR)对IP3R1表达的调控作用,以期为肝肾综合征(HRS)肾小球滤过虑下降的发生机制和防治思路提供理论依据.方法：实时定量PCR和Western blot检测TNFα (100 ng/ml)诱导HMCs表达IP3R1 mRNA和蛋白的情况,PD98059 (20μmol/L)、SB203580 (20μ mol/L)、SP600125 (10 μmol/L)预处理HMCs后,再予TNFα刺激,检测IP3R1 mRNA和蛋白表达的变化,Western blot检测TNFα刺激HMCs不同时间后,p-ERK、p-JNK和p38 MAPK的磷酸化蛋白表达及分别予PD98059 (20 μ mol/L)、SB203580 (20 μ mol/L)和SP600125 (10 μmol/L)预处理后,再予TNFα刺激,检测p-ERK1/2、p-JNK和p38 MAPK的磷酸化蛋白表达的变化.TNFR1和TNFR2分别预处理HMCs后,再予TNFα刺激,Western blot检测IP3R1及p-ERK1/2和p-JNK蛋白表达的变化.多组均数比较采用单因素方差分析.结果：TNFα明显上调HMCs IP3R1蛋白和mRNA的表达,TNFα刺激8h可明显上调IP3R1 mRNA,24h时显著上调IP3R1蛋白表达.阻断p38信号通路对TNFα诱导的IP3R1表达无明显影响；阻断JNK及ERK1/2信号通路均明显抑制TNFα诱导的IP3R1表达.而TNFα对ERK、p38和JNK均可活化.TNFR抗体预处理HMCs后,IP3R1蛋白表达均有不同程度的明显下降.TNFR1/2抗体+TNFα组p-JNK蛋白表达均明显下降,而仅在TNFR1抗体+TNFα组,p-ERK1/2蛋白表达明显下降.结论：TNFα能上调HMCs中IP3R1蛋白及IP3R1mRNA的表达.TNFα可能通过TNFR/JNK和TNFR1/ERK信号途径上调IP3R1的表达.
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