【摘 要】
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目的:应用CISH检测乳腺癌组织HER2基因扩增情况,并对操作方法进行改进和优化。
方法:应用CISH技术,组织芯片检测80例已知HER2基因扩增的乳腺癌组织标本,高温修复加酶消化与仅
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目的:应用CISH检测乳腺癌组织HER2基因扩增情况,并对操作方法进行改进和优化。
方法:应用CISH技术,组织芯片检测80例已知HER2基因扩增的乳腺癌组织标本,高温修复加酶消化与仅用酶消化预处理方法的比较,分析二者的相关性;优化操作方法,总结CISH操作经验,及个别特殊标本制定个体化操作流程.结果:80例(TMA)IHC和CISH证实为HER2基因阳性病例,同时用高温修复加酶消化和仅用酶消化检测。
结果:除9例外,71例二种前处理方法均获得了HER2基因扩增信号,二者的符合率为100%(71/71),其中用高温修复加酶消化的低拷贝病例为25例,高拷贝病例为46例;仅用酶消化获得的低拷贝病例为31例,高拷贝病例为删,两者明显相关(P<0.01).酶消化时间的比较结果显示,30min最佳,核能清楚显示,扩增检测率与高温热修复加酶消化基本一致,15min阳性检测率明显低于高温热修复加酶消化前处理,经60min消化后24例样本核消失,无扩增信号。操作过程中应严格控制切片厚度、消化及杂交后洗涤温度与时间和苏木精衬染时间等。
结论:GISH检测乳腺癌HER2基因扩增的结果与IHC检测的蛋白表达结果—致,可作为乳腺癌HER2基因检测的—项新技术,但在具体操作时,应注意严格控制切片厚度、消化及杂交后洗涤温度与时间、苏木精衬染时间等因素。对极少部分病例标本应采用个体化的操作流程。
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