【摘 要】
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卟啉铁作为一种能与富含G碱基的寡核苷酸链组成一种具有G-四分体构型的DNA酶,其催化性质类似于辣根过氧化酶(HRP),在双氧水的参与下能催化ABTS的反应生成绿色的ABTS+.利用UV-
【机 构】
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华东师范大学化学系,上海,200241
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卟啉铁作为一种能与富含G碱基的寡核苷酸链组成一种具有G-四分体构型的DNA酶,其催化性质类似于辣根过氧化酶(HRP),在双氧水的参与下能催化ABTS的反应生成绿色的ABTS+.利用UV-Vis紫外分光光度计就可以对反应的催化活性进行实时监测.本课题组就是通过利用将hemin分子连接到具有茎环结构的分子信标的茎部尾端，合成一种新型的比色分子信标Hs-MB。本实验组是在信标的茎部尾端进行双标记，通过与目标DNA杂交互补从而达到检测目标分子的目的，避免了荧光分子信标因猝灭基团猝灭不完全而引起的背景吸收。仅通过紫外分光光度计就可以对反应进行的程度达到实时的、快速的、灵敏的检测。在本文中，主要借此合成了一种能识别人体细胞中发生癌变的基因比色分子信标。该信标仅需在目标序列存在时，Hs-MB处于闭合状态，连接在两端的标记分子hemin形成二聚体，由于分子信标的空间阻碍作用很难富含G碱基的DNA链形成DNAzyme，具有非常弱的催化性能;而当信标与互补目标序列杂交后，此时二聚状态被破坏，信标茎环部分打开，hemin主要以单体状态存在，裸露出来的hemin分子与PS2.M易于形成DNAzyme，具有较强的催化活性。在0.1-10nM肉眼就可区分不同目标浓度下体系颜色的变化。该方法操作简单、快速，特异性好，为人体实际样品中检测癌变基因打下了坚实的基础。
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