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点击反应代表性的反应是有机叠氮基团与炔烃的1,3-环加成反应和烯-硫醇反应。本工作发展了两种点击化学方法制备蛋白质整体柱材料:(1)基于叠氮与炔基片段在Cu(I)催化下发生环加成反应(CuAAC)。先制备可“点击”化的聚合物整体柱骨架，即第一步反应在骨架表面修饰功能基叠氮或炔基基团，第二步利用CuAAC在骨架表面修饰疏水长链和硼酸衍生物分别得到新型疏水聚合物整体柱和硼酸亲合整体柱。(2)基于烯-硫醇反应(thiol-ene,TE)制备有机-无机杂化硼酸亲和整体柱。首先采用溶胶-凝胶法，以四甲氧基硅烷硅烷(TMOS)和琉丙基三乙氧基硅烷(MPTMS)作为反应前驱体制备琉基硅胶整体柱。然后利用琉基-烯的点击反应在整体柱上修饰硼酸配基3-丙烯酰胺基苯硼酸(AAPBA)，制成AAPBA-硅胶杂化亲和整体柱。AAPBA-硅胶杂化亲和整体柱在中性条件下对含有顺式二醇的生物小分子表现出良好的特异性亲和能力，并被成功地应用于对糖蛋白的分离分析，具有较大的应用前景。利用点击化学反应方法，只要改变修饰片段就可以得到不同功能基团修饰的新型整体固定相。方法简便，重现性好，可用于蛋白质的高效分离分析。