【摘 要】
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依据假想虹鳟Hepcidin的部分CDS序列设计引物,进而利用RACE PCR、拼接等方法得到虹鳟抗菌肽Hepcidin cDNA全长序列.针对毕赤酵母表达系统的特点,对hepcidin 基因进行稀有
【机 构】
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北京市水产科学研究所,北京100068
【出 处】
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2013年中国水产学会鱼病专业委员会学术研讨会
论文部分内容阅读
依据假想虹鳟Hepcidin的部分CDS序列设计引物,进而利用RACE PCR、拼接等方法得到虹鳟抗菌肽Hepcidin cDNA全长序列.针对毕赤酵母表达系统的特点,对hepcidin 基因进行稀有密码子的优化,目的基因hepcidin在毕赤酵母中的差异性由最初的46.88％优化到34.89％.构建了hepcidin基因的不同的重组毕赤酵母真核表达载体,2种表达载体分别为pGAPZαA(组成型)、pPICZαA(诱导型),4种重组质粒分别为pGAPZαA/pPICZαA-hep 及pGAPZαA/pPICZαA-mhep,分别电转化到毕赤酵母GS 115(Mut+型)、KM71H(Muts型)2 种宿主细胞中,获得重组毕赤酵母菌株.
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