【摘 要】
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本研究从前期筛选的具有抗结肠癌的L.paracasei subp.paracasei X12的细胞壁中提取肤聚糖,探讨其对结肠癌细胞(HT-29)免疫原性死亡的作用及初步机制.采用改良TCA法从L.pa
【机 构】
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哈尔滨工业大学食品科学与工程学院 哈尔滨150090
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本研究从前期筛选的具有抗结肠癌的L.paracasei subp.paracasei X12的细胞壁中提取肤聚糖,探讨其对结肠癌细胞(HT-29)免疫原性死亡的作用及初步机制.采用改良TCA法从L.paracasei subp.paracasei X12中提取出完整肤聚糖,并对其进行形态学分析和组分鉴定.将肽聚糖提取物以不同剂量和时间作用于HT-29,透射电镜观察结果显示其能诱导HT-29产生凋亡小体,并出现内质网和线粒体肿胀、扩张等病理变化,从而抑制HT-29增殖.Ca2+在细胞膜上的暴露是细胞凋亡的重要标志之一,免疫细胞荧光技术和流式细胞术检测出钙网蛋白在HT-29细胞膜上过表达,胞浆中钙离子浓度显著升高,证实了肽聚糖提取物对钙网蛋白膜转位的调控作用.随后研究还发现肤聚糖提取物能增加钙网蛋白的下游免疫因子IL-8和TNF-α的分泌.以上结果均表明该肽聚糖提取物能诱导结肠癌细胞发生免疫原性细胞死亡,钙网蛋白是其关键靶点.
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