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研究炎症相关转录因子NF-B对miR-99a生成的调控作用,并进一步研究miR-99a对LPS所致内皮炎症的保护作用及机制,为动脉粥样硬化疾病的抗炎治疗提供依据.采用PROMO软件对miR-99a的启动子进行分析.构建不同长度的miR-99a启动子区段载体,并将这些载体与NF-κ B共转染,双荧光报告基因检测NF-κ B对报告基因表达的影响.采用EMSA法和ChIP法进行验证.采用ELISA法对炎症相关因子TNF-α、IL-6、IL-1 β和MCP-1进行检测,Western-blot法对NF-κ B、IκB、β-actin、Histon H1和mTOR蛋白进行检测.结果表明,NF-κB可直接作用于miR-99a启动子的-1643至-1652位点,促进miR-99a的表达.在内皮细胞中,LPS(10μ g/ml)可明显抑制miR-99a的表达(降低为正常对照组的10.4％).MiR-99a过表达可明显抑制LPS导致的炎性因子表达升高,抑制mTOR的上调、NF-κ B的核易位.miR-99a对LPS损伤的内皮细胞具有保护作用,为动脉粥样硬化抗炎治疗的潜在靶点.