【摘 要】
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1引言随着生活水平的不断提高,消费者对肉质的要求愈来愈高,肉的嫩度是影响肉质的重要因素,提高肉品质成为继生产性能后家禽育种工作者的又一新目标(Rance等,2002).钙蛋白酶(calpain-calpastatin)系统与宰后肌肉的嫩化过程及肌原纤维蛋白的代谢与更新密切相关的一种由同型异构蛋白水解酶组成的在细胞内大量存在的限制性蛋白水解酶(Taylor等,1995),并在细胞内大量存在且参与生长
【机 构】
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中国农业科学院家禽研究所,江苏扬州225125
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家禽学分会第十八次全国家禽学术讨论会
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1引言随着生活水平的不断提高,消费者对肉质的要求愈来愈高,肉的嫩度是影响肉质的重要因素,提高肉品质成为继生产性能后家禽育种工作者的又一新目标(Rance等,2002).钙蛋白酶(calpain-calpastatin)系统与宰后肌肉的嫩化过程及肌原纤维蛋白的代谢与更新密切相关的一种由同型异构蛋白水解酶组成的在细胞内大量存在的限制性蛋白水解酶(Taylor等,1995),并在细胞内大量存在且参与生长及代谢(Croall等,1991).对肌肉生长过程中蛋白质的更新有重要作用,在肉用畜禽中显著影响宰后肉的嫩度(Kretchmar等,1994).然而,鸡CAST基因启动子区与肉质性状相关的报道还很少,尤其是不同基因型启动子活性对转录调控的影响研究极少,阐明CAST基因启动子区多态性与肉质性状的关系及不同基因型的启动子活性,对肉鸡育种提供有力的理论依据.2材料与方法 本研究以中国农业科学院家禽研究所选育F、D、Y、B和S等 5个优质肉鸡品系为试验素材.利用PCR-RFLP技术检测钙蛋白酶抑制蛋白(Calpastatin,CAST)基因的SNPs,并分析其多态性与鸡PH值、维生素B1、肉色、系水力、肌内脂肪和肌纤维密度之间的关系.为探讨CAST基因启动区G-198A突变位点不同基因型启动子活性,构建鸡CAST基因5调控区CAST517序列不同基因型双荧光素酶报告基因表达载体(pGL3-CAST517/promoter),脂质体转染法转染至293T细胞,检测不同基因型的启动子活性,在线工具对CAST517序列结合位点和转录因子进行预测,分析转录水平.3结果与讨论本试验在距CDS-198位点发现1个突变位点(G→A),G-198A位点检测到3种基因型GG、GA和AA,相关分析显示,AA基因型个体的肌内脂肪和肌纤维密度显著高于GG型和GA型个体(P＜0.05),而其他肉质性状无显著差异(P＞0.05).结果显示CAST517A作为启动子时,萤火虫对海肾荧光素酶的强度比值要比使用CAST517G启动子效率提高113.89％,呈高效表达(P＜0.01).在线预测结果显示CAST517序列存在1个类似TATA盒、1个转录起点、3个潜在的顺式调控原件：PR、ER和GATA-1和1个潜在的反式调控原件：TGGCA-binding.由此可见,对于肉质性状而言,AA是最有利基因型,携带CAST517A的个体具有较高的转录水平,说明该基因可能对鸡肉质性状有一定的调控作用,对肉鸡的选育提供理论基础,为CAST基因的表达和功能及优质肉鸡的选育提供可靠依据.
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