siRNA特异性抑制猪脑心肌炎病毒在BHK-21细胞中的复制

• 作 者: 贾红[1]盖新娜[1]郭鑫[1]杨汉春[1]于康震[2]陈振海[1]陈艳红[1]查振林[1]
• 机 构: 中国农业大学动物医学院 农业部预防兽医学重点开放实验室,北京 100094
• 出 处: 2007年中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会学术研讨会
• 发表日期: 2007年期

为探讨siRNA在BHK-21细胞中对猪脑心肌炎病毒(EMCV)的作用，以EMCV BJC3分离株各基因为靶点，设计并合成了8对siRNA，通过脂质体法转染BHK-21细胞，转染后4小时感染500 TCID50 EMCV BJC3，通过感染后不同时间段进行CPE观察、TCID50测定、real-time PCR、间接免疫荧光试验和Western-blot检测评价其对EMCV增殖的抑制作用。结果表明，JH-4666、BJC-807、BJC-1739、BJC-2363和BJC-3269能够在BHK-21细胞中不同程度地抑制EMCV病毒的复制和增殖，其中JH-4666、BJC-2363和BJC-3269效果显著，抑制作用存在剂量依赖关系，并且siRNA混合后能够增强抑制效果。该研究为探索EMCV感染的防治新途径奠定了基础。