低含量血清培养IBRS-2细胞及其增殖猪细小病毒N株的试验

来源 :广西兽医协会、广西畜牧兽医学会畜禽传染病学分会2017年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:feiyulaile
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依次采用含8%、4%、2%、1%小牛血清MEM培养基驯化IBRS-2细胞,并在驯化好的IBRS-2细胞上接种猪细小病毒N株(PPV N株),以确定PPV N株在该培养体系下的生长情况.结果用含8%、4%、2%小牛血清MEM培养基各进行5代次驯化,IBRS-2细胞能完全适应且生长状态良好;当血清浓度降至1%时,仅传代1次,细胞就无法保持良好状态,细胞出现贴壁较差,拉网,生长停滞等现象.各血清浓度培养体系中细胞生长曲线测定结果显示,在细胞培养的0、24、48、72、96h各组细胞密度与常规培养的对照组差别不明显.因此用MEM培养基培养IBRS-2细胞时,血清最低含量为2%.用该体系培养IBRS-2细胞接种PPVN株后,通过TCID50和HA测定病毒滴度.结果显示,2%血清培养的PPV N株病毒滴度平均值与常规条件培养(6~10%血清)的无明显差别,表明该体系可用于PPVN株的增殖.本试验成功驯化出了能在低含量血清培养条件下生长良好的IBRS-2细胞,血清浓度可以降低到2%,且PPVN株在该低含量血清培养的IBRS-2细胞中能良好增殖.
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