【摘 要】
：
目的:据不完全统计,全世界每年新发肝癌患者达六十万,居全球第五大恶性肿瘤.中国和印度乃是世界范围内肝癌的高发区域.截止至2013年年底,肝癌死亡率位于我国恶性肿瘤死亡率第二位,仅次于肺癌.肝癌高发区集中在东南沿海及东北吉林等地区.从临床上看,肝癌发病率呈逐年上升趋势,发病率较10年前提高30％,而且发病年龄也提前10岁左右.肝癌患者死因中,90％是因其转移.左右。肝癌患者死因中，90%是因其转移。
【机 构】
：
上海中医药大学中药学院 香港中文大学生理研究所
【出 处】
：
中华中医药学会中药实验药理分会2014年学术年会
论文部分内容阅读
目的:据不完全统计,全世界每年新发肝癌患者达六十万,居全球第五大恶性肿瘤.中国和印度乃是世界范围内肝癌的高发区域.截止至2013年年底,肝癌死亡率位于我国恶性肿瘤死亡率第二位,仅次于肺癌.肝癌高发区集中在东南沿海及东北吉林等地区.从临床上看,肝癌发病率呈逐年上升趋势,发病率较10年前提高30％,而且发病年龄也提前10岁左右.肝癌患者死因中,90％是因其转移.左右。肝癌患者死因中，90%是因其转移。因此，肝癌的转移复发乃是影响长期疗效的主要障碍。传统中药藤黄(gamboge)来源于藤黄科(Gittiferae)植物Garcinia hanburyi Hook.f.etc.所分泌的干燥树脂，最早记载于五代《海药本草》，性寒，味酸、辛、涩，有毒，主帅牙蛀齿;后于清朝《本经逢原》中记载“藤黄性毒，而能攻毒”，主治痈疽、肿毒、顽癣、恶疮等顽疾。化学研究报道，口山酮类(xanthones)和多环多异戊烯基间苯三酚类(polycyclicpolyprenylated acylphoroglucinols,PPAPs)为藤黄属植物特征内源性小分子化合物。本研究旨在以开发中药资源为契机，以中医理论为指导，基于抗肝癌转移的云南藤黄活性成分筛选，对活性化合物进行深入探讨，运用蛋白质组学和分子生物学手段，结合体内外实验，探寻其抑制肝癌细胞侵袭转移的靶点，并系统深入地阐述其潜在的作用机制，为寻找新型抗癌药提供新颖的前景，启示新的抗癌机理。
方法:运用肝癌细胞迁移模型进行肝癌转移的活性成分筛选:运用肝癌细胞迁移、侵袭和体内肝癌转移模型证实活性化合物抗肝癌转移的活性:运用蛋白组学探寻活性化合物抑制肝癌细胞转移的靶点;运用蛋白质印迹法和免疫荧光法系统深入地阐述活性化合物潜在的作用机制。
结果:首先，对云南藤黄果实中分离得到8个PPAP类化合物进行肝癌细胞迁移活性筛选，结果显示，Guttiferone K(GUTK)最佳，能够浓度依赖性、时间依赖性地抑制人肝癌细胞迁移和侵袭。其次，肝癌肺转移体内实验证实，GUTK给药28天后，能够浓度依赖性地抑制肝癌肺转移，其浓度于10mg/kg时，活性与5-Fu相当;其三，蛋白组学结果显示，经GUTK干预过的Hep G2细胞，有31个蛋白发生了改变，其中18个蛋白表达上调、13个蛋白表达下调，其中Profilin 1(PFN 1)蛋白上调了7.4倍。其四、采用PFN 1 siRNA，结果显示，能够不同程度的敲除细胞中PFN 1的表达，并且对肝癌细胞的生长没有影响。在经过PFN 1siRNA敲除的肝癌细胞中，GUTK抑制肝癌细胞迁移和侵袭的能力明显减弱。最后，免疫荧光法结果显示，GUTK随着PFN 1表达增加从而抑制F-actin的表达，同时，蛋白质印迹法结果显示，GUTK能够抑制Racl/cdc42-PFN 1-ARP2/3信号通路，从而抑制细胞骨架蛋白actin的聚合。
结论:云南藤黄果实PPAP类化合物GUTK主要通过Rac 1/cdc42-PFNI-ARP2/3信号通路，从而抑制肝癌细胞迁移和侵袭，提示GUTK是一类具有显著抗肝癌转移活性的候选药物，为新型抗癌药物的开发提供了可行的指导依据。
其他文献
目的:研究桂枝芍药知母汤对佐剂性关节炎模型大鼠临床体征、血清因子、病理的影响.方法:SD大鼠随机分为六组,即空白对照组、模型对照组、地塞米松组、桂枝芍药知母汤高、中、低剂量组.除空白对照组注射0.1ml生理盐水外,模型组及给药组注射0.1ml完全弗氏佐剂,造模后每隔3d观察大鼠足肿胀度,第15d开始各组给予相应药物,第45d处死取血清ELISA法检测IL-6、RF、anti-CCP,致炎侧踝关节进
目的:在异硫氰酸荧光素(FITC)致小鼠变应性接触性皮炎模型的诱导初期给与黄芪甲苷,观察黄芪甲苷对小鼠变应性接触性皮炎的影响,并探索其作用机制.方法:小鼠在d2、d3用FITC溶液对小鼠进行腹部致敏,每天一次,d6用FITC溶液攻击小鼠右耳,24h后观察小鼠耳肿胀,并对耳组织进行病理组织学检查,ELISA检测小鼠耳组织匀浆中IL-4、IL-13水平.在上述模型诱导初期(dl-d5)给与黄茂甲昔25
目的:探讨乌鳖口服液对自身免疫性卵巢早衰小鼠的影响.方法:通过皮下多点注射小鼠透明带3建立自身免疫性卵巢早衰小鼠模型.然后连续4周给予乌鳖口服液进行治疗,每天剂量为(16.5g/kg).通过酶联免疫法检测小鼠抗透明带抗体,用免疫组化法测定脾脏T细胞CD4+、CD8+的含量.同时用免疫组化法测定卵巢Fas、FasL蛋白的表达.卵巢和脾脏做病理组织学的分析.结果:乌鳖口服液急性毒性实验显示乌鳖口服液经
从金属切削液的开发、使用、维护及后处理方面入手,以笔者团队所做的相关工作为例,说明了通过开发高性能、易降解的环保型切削液,建立切削液管理、维护体系,并对切削液废液进行资源化处理,可以使切削液在机械加工中更好地发挥作用,降低刀具磨损、提升加工质量、改善工作环境;同时,还可以提升切削液的生物降解率,延长切削液使用寿命,降低废液排放,以及减轻切削液对人体及环境的影响,进而助力制造业的绿色低碳化转型,推进
目的:研究发酵虫草菌粉对阿霉素诱导的大鼠氧化应激反应的对抗作用,并对其在血清、心脏和肝脏不同部位的抗氧化应激作用效果进行比较.方法:采用尾静脉注射阿霉素(总剂量7.5mg/kg,分两次给予,间隔1w)的方法诱导大鼠氧化应激模型,造模2w后,对模型大鼠进行随机分组,分别为模型对照组、虫草菌粉胶囊组和虫草菌粉片剂组,另设正常对照组,每组各12只.每天灌胃给予受试药物混悬液,剂量均为1.5g/kg虫草菌
全钒液流电池作为大规模电能储存技术具有功率和容量可以独立设计、选址灵活、响应快速、高安全性和长寿命的特点。当前,全钒液流电池实现广泛应用的关键在于通过多孔电极的优化设计来提高功率密度,缩减给定设计功率下的电堆尺寸以及减少组堆材料,从而实现成本的大幅下降。传统液流电池体系通常使用碳毡作为电极,这种电极比表面积低,反应动力学差,因此需要发展高比表面积的新型结构电极。静电纺丝法制备的高比表面积纤维垫,能
目的:白血病化疗药物的毒副反应极其耐药性仍是尚未解决的难题,研发安全有效抗白血病的中药新药很有必要.受科技部"十一五"重大新药创制专项资助,采用抗白血病的生物学活性试验,筛选并确定了作用最明显的低极性人参皂苷ALK,成分含量明确.前期实验证明ALK通过抑制白血病细胞增殖、促进凋亡、增强化疗药敏,并阻滞异常增殖的恶性信号传导而抗白血病.本文在此基础上，研究ALK阻滞白血病细胞进入增殖周期，诱导原始细
多通道SAR相比单通道SAR有着更高的自由度,可以从多个角度对地球表面场景进行观测,大大提高了对地信息获取能力。多通道SAR不仅能够实现传统的二维高分辨成像,还能实现干涉测高、动目标检测与成像和干扰抑制的功能,在军事和民用领域都发挥着重要的作用。特别是军事领域的广泛应用,对我方军事目标防护构成巨大威胁。如何有效控制多通道SAR目标的相关特征,干扰SAR使其难以成像,在雷达对抗中具有重要应用价值。本
目的:四嗪二甲酰胺(ZGDH-1)是根据药物构效学设计并合成的新四嗪类化合物,观察其抑制粒系白血病Kasumi-1细胞增殖、诱导凋亡及阻滞细胞周期的效应,并探讨其作用机制.方法:细胞经不同浓度ZGDH-1孵育24、48和72h后,MTT法检测抑制增殖作用,细胞形态学和凋亡小体;Annexin Ⅴ阳性的凋亡细胞和DNA亚二倍体;Western免疫印迹法检测Caspase-3蛋白活性、IκB和NFκB
目的:P-蛋白(P-gp)是肝癌(HCC)多药耐药(MDR)的一个重要机制.MDR(至少部分)与PKCα有关.本研究旨在证实中药川芎有效成分川芎嗪(TMP)通过抑制Ca2+-PKCα而逆转了肝癌细胞的多药耐药.方法:通过细胞活性实验、激光共聚焦等方法,检测细胞活性、胞内钙水平、相关蛋白表达.结果:经TMP处理的HCC耐药细胞中PKCa荧光强度与对照组相比下降到(33.33±1.7)％ (P<0.0