【摘 要】
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原癌基因c-myb在细胞增殖,变异和凋亡过程中起着重要的调节作用,其过度表达是人类血癌,淋巴癌和结肠癌的发病机理之一.经研究表明,人类c-myb启动子区富含胞嘧啶碱基序列,
【机 构】
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江苏省生物医药功能材料协同创新中心,江苏省新型动力电池重点实验室,江苏省生物功能材料重点实验室,南京师范大学化学与材料科学学院,江苏 南京 210097
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原癌基因c-myb在细胞增殖,变异和凋亡过程中起着重要的调节作用,其过度表达是人类血癌,淋巴癌和结肠癌的发病机理之一.经研究表明,人类c-myb启动子区富含胞嘧啶碱基序列,有可能经过相互嵌插形成半质子化胞嘧啶-胞嘧啶碱基对,而自身折叠形成i-motif结构.研究这类特殊DNA结构的形成对于调控基因表达和发展抗癌药物具有重要的科学意义.首先,利用圆二色谱(CD)探索i-motif形成的溶液环境,包括DNA浓度及退火条件,缓冲溶液的种类、浓度和pH等.其中,酸性条件(pH=5.0-6.0)有利于i-motif结构的形成(如图1A),随着pH的升高,286nm处的i-motif特征峰明显降低且发生蓝移,计算得Tranistion pH=8.1.通过变温圆二色谱求不同pH下DNA的解链温度Tm.结果如图1B所示,pH 5.0和7.0时DNA的解链温度Tm分别为69.8oC和46.1oC,证明酸性条件下能够形成稳定的i-motif结构.此外,结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳探索i-motif结构的折叠方式,经实验证明当DNA浓度较小时,易形成分子内折叠的i-motif DNA.
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