【摘 要】
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目的：秀丽隐杆线虫(简称线虫)是公认的衰老与寿命研究模型.线虫寿命与其应激耐受能力有关.本研究探索以线虫的热耐受性指标为检测终点时,喂饲线虫的食物大肠杆菌OP50菌株的最
【机 构】
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北京市疾病预防控制中心,北京市预防医学研究中心,食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室,北京100013;首都医科大学公共卫生学院,北京100069北京市疾病预防控制中心,北京市预防医学研究中心,食物中
【出 处】
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2017年第十五届中国北方实验动物科技年会
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目的：秀丽隐杆线虫(简称线虫)是公认的衰老与寿命研究模型.线虫寿命与其应激耐受能力有关.本研究探索以线虫的热耐受性指标为检测终点时,喂饲线虫的食物大肠杆菌OP50菌株的最优灭活方法及其在液体培养体系中的适宜浓度.然后应用该优化后的喂饲方法,初步评价PM2.5对线虫热耐受性的影响,为进一步开展PM2.5的线虫寿命影响及其分子机制研究奠定基础.
方法：采用两种常见灭活方法(热处理,钴60γ照射)处理OP50菌株,及未处理的活OP50菌株(设为对照组)分别喂饲线虫,设定每组线虫的液体培养基(S-medium溶液)与加入细菌浓缩液(OD=1.949)的体积比分别为1∶50和1∶100两个水平.通过观察不同处理菌喂饲下线虫生长发育的基本形态学差异及喂饲5天后对热耐受性的影响来评价热处理、钴60γ照射处理菌组与对照活菌组之间的差异,从而确定不影响线虫生长发育且对毒性效应无干扰的OP50菌的灭活方式及其适宜浓度.在此基础上,采用北京市冬季室外PM2.5水溶性样品(终浓度分别为A组94.587μg/ml、B组119.29μg/ml),处理线虫5天、10天后观察其对热耐受性的影响.
结果：热处理菌组喂饲的线虫体长较短,体宽较窄,生长较对照活菌组喂饲线虫缓慢,而钴60照射处理菌组喂饲的线虫生长状态和对照组没有显著差异.同时可见OP50在液体培养基中所占比例为1∶100时线虫生长较1∶50时缓慢.染毒至第10天时,在热应激条件下阳性减寿组(2％葡萄糖)和PM2.5染毒处理组均可使线虫生存曲线左移.与空白对照组相比阳性减寿组平均生存时间缩短了48.43％(p＜0.01),PM2.5染毒处理组线虫平均生存时间分别缩短了26.29％(A组)和31.25％(B组)(p＜0.01).
结论：钴60照射是线虫热耐受性实验研究中较合适的OP50灭活方法.细菌浓缩液和液体培养基的体积比为1∶50优于1∶100.热耐受性试验结果表明,PM2.5作用下,线虫在热应激条件下平均生存时间缩短约1/3,提示PM2.5降低线虫的热耐受能力,有可能进一步影响线虫的寿命.
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