【摘 要】
：
根据PCV2ORF2基因的序列设计两条引物从PCV2的PK15细胞培养物中扩增出ORF2基因(702bp).将此基因片段克隆入pMD18-T载体,经酶切、测序鉴定筛选出重组质粒pMD-ORF2.将PCV2ORF2
【机 构】
：
广东省农科院兽医研究所,广州,广东,510640
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会
论文部分内容阅读
根据PCV2ORF2基因的序列设计两条引物从PCV2的PK15细胞培养物中扩增出ORF2基因(702bp).将此基因片段克隆入pMD18-T载体,经酶切、测序鉴定筛选出重组质粒pMD-ORF2.将PCV2ORF2基因克隆入pAdeasy腺病毒载体系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV中,获得重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-ORF2,将重组质粒与腺病毒骨架载体共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒pAdCMV-ORF2,然后用PacI线性化后转染293细胞,在293细胞内包装出重组腺病毒.通过荧光显微镜观察、PCR检测和Westernblot检测证明PCV2ORF2基因在293细胞内获得表达,ORF2多肽具有良好的免疫原性。
其他文献
根据GenBank中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的美洲株ATCCVR-2332的基因序列分别设计并合成针对PRRSVORF3、ORF5和ORF6基因的引物,通过RT-PCR方法从广东潮州(GDCZ1、GDCZ2)
将猪生长激素(pGH)基因,克隆到腺病毒转移载体质粒pAdenoVator-CMV5-IRES-GFP中构建含pGH基因的腺病毒穿梭载体,用同源重组的方法将其与腺病毒基因组质粒pAdenoVatorDE1/E3共
本文运用平衡试验法,以去势生长公猪为试验动物,采用4×4拉丁方设计,用玉米淀粉-葡萄糖-玉米蛋白粉-血粉等原料配置低磷的基础饲粮,用待测矿物质磷源替代基础饲粮中玉米淀粉
目的:研究血液凝血过程对自发性脑出血脑水肿的影响.方法与结果:我们参照Bullock和Yang方法制作成功大鼠自体定量新鲜无肝素未凝动脉血脑出血模型,并予改进,该模型成功率达80
用DNA重组技术,将已克隆的猪IL-6基因阅读框片段插入非融合原核表达质粒pBV220中的适当位置,获得重组质粒pBVpIL-6,转化大肠杆菌DH5α后,42℃诱导阳性表达菌.经SDS-PAGE检测
目的 观察人免疫球蛋白注射剂(IVIG)治疗不同严重程度肠道病毒71型(EV71)手足口病(HFMD)患儿的临床疗效及安全性.方法 选取124例EV71型HFMD患儿作为试验组,并按病情严重程度
利用PCR分别扩增猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)ORF1基因和ORF2基因,按正确的读码框以串联的方式依次克隆入pMD18-T载体.经过酶切鉴定和测序证实无误后,酶切目的基因亚克隆入腺病毒穿
根据PCV2ORF1基因的序列设计两条引物从PCV2的PK15细胞培养物中扩增出ORF1基因(945bp).将此基因片段克隆入pMD18-T载体,经酶切、测序鉴定筛选出重组质粒pMD-ORF1.将PCV2ORF1
目的:探讨myosin-Ab在MG发病机制中所起的作用.方法:采用ELISA法检测重症肌无力(MG)组54例,正常人组92例及其他疾病对照组28例血清中myosin-Ab的表达.结果:Myosin-Ab在血清中