含猪生长激素基因的重组腺病毒的构建

来源 :中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaomi1028
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将猪生长激素(pGH)基因,克隆到腺病毒转移载体质粒pAdenoVator-CMV5-IRES-GFP中构建含pGH基因的腺病毒穿梭载体,用同源重组的方法将其与腺病毒基因组质粒pAdenoVatorDE1/E3共转化大肠杆菌BJ5183株,获得重组腺病毒质粒pAd-pGH,将其转染293细胞,获得含猪生长激素基因和绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺病毒Ad-pGH.用Ad-pGH感染293细胞和PK15细胞,均可检测到GFP和pGH基因的表达.在荧光显微镜下可观察到带绿色荧光的细胞.经SDS-PAGE电泳分析和WesternBlot检测,均有一条与抗pGH多克隆抗体呈特异性反应的约22KD的蛋白条带。
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