香蕉不同抗性品种对枯萎病侵染的蛋白组学分析

• 作 者: 李信申;阮小蕾;李华平;
• 机 构: 华南农业大学植物病毒研究室,广州510642
• 出 处: 中国植物病理学会2010年学术年会
• 发表日期: 2010年期

香蕉作为重要的经济和粮食作物,主要集中种植于南美洲和亚洲的热带和亚热带地区.我国是世界上第三大香蕉生产国,而香蕉的生产却一直受到病害的为害,其中香蕉枯萎病对香蕉产区的为害最为严重,导致了许多蕉园的荒废.到目前为止,香蕉枯萎病发生机理和香蕉的抗病机制尚不清楚,本研究拟采用双向电泳法分析不同香蕉品种在枯萎病侵染后的蛋白组学差异,从中寻找香蕉组织中相关抗性蛋白,为今后采取有效的防治方法打下基础.总蛋白提取的方法是获得高分辨率蛋白质图谱的前提条件，在众多的植物材料中，香蕉叶片组织中含有的氧化酶，多酚化合物(单宁、酚类、黄酮类和木质素类)，蜡质和碳水化合物等多种干扰物，由于其成分之多及含量之高，成为总蛋白提取比较困难的代表性植物。对于总蛋白质的提取，目前采用的有三氯乙砌丙酮沉淀法、丙酮沉淀法、酚抽提法和分级沉淀法4种方法。本实验室综合比较了这几种方法对香蕉叶片总蛋白的提取效果，SDS-PAGE电泳结果显示:分级沉淀法所得图谱条带完整清晰，蛋白质分子覆盖的比较广，二磷酸核酮糖氧合酶/梭化酶(Rubisco)条带干扰比较弱;酚抽法所得图谱条带完整清晰，但是Rubisco条带干扰比较强;三氯乙酸l丙酮沉淀法提取的蛋白质含量最高，但所得图谱中Rubisco条带干扰严重;丙酮沉淀法效果最差，提取的蛋白质含量低，条带不清晰，并且图谱中Rubisco条带干扰严重。说明分级沉淀法适合香蕉叶片总蛋白的提取，可以有效的去除干扰物质，避免Rubisco亚基遮蔽邻近的蛋白质，使丰度比较少的蛋白显著的显示出来。目前已获得不同品种的总蛋白质，双向电泳分析正在进行中。