【摘 要】
：
目的：观察人白血病细胞经过长期传代后,细胞内脱氧胞苷激酶(deoxycytidine kinase,dck)mRNA表达及其酶活性的变化规律,来探讨dck与阿糖胞苷(Ara-C)疗效及耐药现象发生的相关性.方法：早幼粒白血病细胞系(H L-60)及其耐药细胞株(HL-60/R)经过体外长期传代过程中,采用实时PCR方法、核素液闪法测定HL-60和HL-60/R细胞内dck的mRNA表达水平及其酶活
【机 构】
：
同济大学附属同济医院儿科 200065
【出 处】
：
中华医学会第十八次全国儿科学术会议
论文部分内容阅读
目的：观察人白血病细胞经过长期传代后,细胞内脱氧胞苷激酶(deoxycytidine kinase,dck)mRNA表达及其酶活性的变化规律,来探讨dck与阿糖胞苷(Ara-C)疗效及耐药现象发生的相关性.方法：早幼粒白血病细胞系(H L-60)及其耐药细胞株(HL-60/R)经过体外长期传代过程中,采用实时PCR方法、核素液闪法测定HL-60和HL-60/R细胞内dck的mRNA表达水平及其酶活性水平.通过体外培养传代,观察两种细胞株经长期传代(5、10、20、30、40、50代)后细胞内dck的mRNA表达及酶活性的变化规律.结果：传代初期结果显示,HL-60和HL-60/R两组细胞株之间的mRNA表达水平分别为0.37±0.03和0.17±0.03,活性值分别为0.069±0.006nmol/min/mg.protein和0.019±0.007nmol/min/mg.protein,HL-60的dck mRNA表达水平和酶活性均明显高于HL-60/R(P＜0.05).HL-60和HL-60/R两组各传代节点(10、20、30、40和50代)的dck mRNA表达水平与酶活性与本组第5代细胞相比,则无明显变化(P＞0.05).结论：HL-60及HL-60/R两组细胞株间的mRNA表达和酶活性在传代初期存在显著差异,且两组间的差异持续存在.但与各自的初期传代相比,长期传代后的mRNA表达和酶活性变化并不明显,提示dck仅与Ara-C的初期疗效明显相关,而与Ara-C耐药现象的发生可能无关.
其他文献
目的：通过文献回顾来评估重症监护病房(ICU)患者早期活动的效果.方法：计算机检索Cochrane Database of Systematic Reviews(2012年第12期)、JBI Database of Systematic Reviews、MEDLINE(1950-2012)、CBM(1978-2012)中关于ICU患者早期活动安全性及有效性的文献,同时筛检纳入文献的参考文献,文献类
目的：探讨CPTⅡ基因外显子突变对重症肠道病毒脑炎的影响.方法：1.研究对象从2010-2012年收集的362例肠道病毒脑炎中选取25例重症脑炎患儿进行CPTⅡq全基因外显子序列分析.2.实验方法(1).CPTⅡ基因外显子(编码区)测序.(2)外周血ATP生成水平分析.结果：1.CPTⅡ的5个外显子中,第4号外显子突变最多,仅有1个位点在5号外显子上,分析如下:(1)25例重症脑炎患儿中9例患儿F
目的：研究脑源性神经营养因子(BDNF)与AMPA受体尤其GluR2的相互关系,为进一步针对性调控BDNF及AMPA受体,保护海马神经元提供理论依据.方法：选用孕17-18天SD大鼠8只,取胎鼠体外培养海马神经元细胞爬片,同批细胞爬片随机分为对照组(N组),BDNF实验组(BDNF组),对照+1-Naphthylacetyl spermine Trihydrochloride(NASPM,特异性阻
目的：目前在小儿心脏手术中应用体外循环可能使患儿中枢神经系统陷入亚缺血缺氧状态,造成一定损伤.近期研究发现在缺血缺氧损伤下细胞外组蛋白水平会升高,而且应用组蛋白抗体可以减轻其损伤.本文将就组蛋白引起的小鼠神经细胞凋亡及其机制进行探索.方法：将小牛胸腺组蛋白与原代小鼠神经细胞共同孵育后,经Annexin V/PI染色后行流式细胞术分析,以检测细胞外组蛋白对原代小鼠神经细胞凋亡的诱导作用.利用肝素或低
目的：观察腺病毒介导的心肌营养素-1 (Adv-EG FP-CT-1)对大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)神经分化中细胞存活的影响.方法：全骨髓贴壁筛选法分离培养rBMSCs,流式细胞术鉴定细胞表面标记性蛋白.将细胞分为以下4组:对照组、Adv-EGFP(重组腺病毒增强型绿色荧光蛋白)转染组、Adv-EGFP-CT-1转染组及诱导剂组,各转染组分别向培养液中加入对应的腺病毒液,转染复数MOI=2
目的:观察七氟烷低流量维持麻醉对行择期手术的儿童患者血流动力学、肝肾功能与血气指标的影响,并评估其安全性和可行性.方法:选择在全麻插管下行择期手术(手术时间＞3小时)的儿童患者20例,ASA分级Ⅱ-Ⅲ级,随机分为A(低流量组)、B(中等流量组)两组(n=10).两组诱导均采用静脉快速诱导,气管插管后氧流量调至6L/min,七氟烷挥发罐调至3％,同时予丙泊酚3-5mg/kg·h静脉泵入.5min后A
目的：通过应用CTLA4Ig及anti-CD154分别阻断致敏小鼠的B7/CD28及CD40/CD154共刺激信号途径,探讨其对异基因造血干细胞(HSC)植入的影响,为临床应用异基因造血干细胞移植(HSCT)治疗致敏受者免疫排斥提供实验基础.方法：实验将BALB/c小鼠分4组:①-7天致敏组②-7致敏同时应用CTLA4Ig+anti-CD154组③正常小鼠应用CTLA4lg及anti-CD154的
目的：分析24例Vl型胶原蛋白相关肌病的临床和分子遗传学特点,以提高对该类疾病的认识,并为Vl型胶原蛋白相关肌病患者的确诊、遗传咨询及产前诊断打下基础.方法：收集并分析24例Vl型胶原蛋白相关肌病先证者的临床资料,提取先证者与父母的外周血DNA,采用基因组DNA直接测序法对先证者进行COL6A1,COL6A2,COL6A3基因突变检测,发现变异并反向证实后对父母相同位点进行测序确定变异来源,进一步