【摘 要】
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目的：为了选择热应激条件下巴马香猪外周血单核细胞(PBMC)在体内较稳定的内参基因,为实时荧光定量PCR检测目的基因表达奠定基础.方法：本研究利用实时荧光定量PCR法检测了AC
【机 构】
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Department of Veterinary Medicine, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China
【出 处】
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中国畜牧兽医学会第三届中国兽医临床大会
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目的：为了选择热应激条件下巴马香猪外周血单核细胞(PBMC)在体内较稳定的内参基因,为实时荧光定量PCR检测目的基因表达奠定基础.方法：本研究利用实时荧光定量PCR法检测了ACTB、GAPDH、TBP、B2M、RPL和18sRNA在热应激不同时段巴马香猪PBMC和体外培养的巴马香猪PBMC热打击后恢复9h的表达.结果：geNorm软件分析表明,体内热应激试验内参基因的稳定性从高至低依次为：ACTB/RPL＞ B2M＞ TBP＞ 18S＞ GAPDH.体外热打击恢复后PBMC中稳定性最高的基因为B2M和TBP,最低为GAPDH.NormFinder软件分析表明,在热应激的第ld、7d、14d和21d,最稳定的基因分别为RPL、TBP、RPL和B2M,最佳基因组合分别为ACTB+RPL、TBP+RPL、B2M+RPL和TBP+RPL.而体外稳定性最高的内参基因为ACTB,由高到低依次为TBP、RPL、B2M和GAPDH,最佳基因组合则为TBP+ACTB.结论：内参基因稳定性受处理条件影响,热应激条件下ACTB适合作为巴马香猪基因定量的内参基因.
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