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本实验建立了肌肉中氢化可的松、可的松、泼尼松和地塞米松的高效液相色谱-电喷雾串联质谱(LC-ESI-MS/MS)检测方法.样品经过酶水解、提取、HLB固相萃取净化和液相色谱分离后,在多反应选择性监测模式(MRM)下进行信号采集和测定.四种糖皮质激素类的检出限为0.25ug/kg,定量限为0.5ug/kg,在0.5~50μg/L范围内具有良好的线性关系.添加浓度为1μg/kg、5μg/kg和50μg/kg时,四种物质的平均回收率为74.0%-103.5%,相对标准偏差小于9.0%.