【摘 要】
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纳米材料可使吸附目的基因形成纳米基因复合物，通过内吞或吞噬作用进入细胞质，属于非病毒型基因载体系统，具有易于制备和安全性高等特点。本研究利用纳米材料作为载体探索转基因
【机 构】
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新疆畜牧科学院中国-澳大利亚绵羊育种研究中心 新疆乌鲁木齐830000
【出 处】
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第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会
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纳米材料可使吸附目的基因形成纳米基因复合物，通过内吞或吞噬作用进入细胞质，属于非病毒型基因载体系统，具有易于制备和安全性高等特点。本研究利用纳米材料作为载体探索转基因技术，克隆并构建表达载体pLEX-GFP。利用MgCIZ,AICI,NaOH三种化合物制备直径约100nm呈六边形双层片状结构的Mg2A1-Cl-LDH纳米颗粒。以纳米颗粒Mg2A1-Cl-LDH结合pLEX-SOX2-GFP转染HEK 293T，流式细胞仪检测GFP荧光信号评估转染效果。优化后的转染条件是:质粒DNA与LDH共孵育的时间在15分钟是转染效率最高(6.93％);质粒DNA与LDH的质量比为4:50时转染率最高(11.17%)。纳米材料浓度与转染效率呈正比，但同细胞的存活率呈反比，在200gg/ml为最佳浓度，细胞存活率最高(87%)，转染后的培养时间24小时时转染率最好(17.4%)。转染质粒在细胞内均有明显的绿色荧光蛋白的表达，说明该转染方法可靠，表达能力强。
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