【摘 要】
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目的：应用均相时间分辨荧光(HTRF)技术,筛选发现具有抑制表皮生长因子受体(EGFR)活性的角倍提取物,同时采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOF-MS
【机 构】
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中国医学科学院药用植物研究所,北京 100193
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目的：应用均相时间分辨荧光(HTRF)技术,筛选发现具有抑制表皮生长因子受体(EGFR)活性的角倍提取物,同时采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)对其活性部位进行分析和鉴别.方法:药材经石油醚渗滤、乙醇提取、乙酸乙酯萃取和水煎煮后,得到四个提取部位.采用HTRF法检测角倍乙酸乙酯提取物对ERFR的抑制作用,计算提取物对EFFR的抑制率.采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱,200-400 nm 扫描,使用ESI离子源,在正离子模式下采集数据.结果:角倍的乙酸乙酯部位显示较强的EGFR抑制活性,并从其活性部位中分析鉴定出14个化学物,主要成分为单宁类化合物,其中11个分别是石榴皮鞣素,香草醛,六羟基二苯酰胺葡萄糖,鞣花单宁,杨梅苷,原儿茶素,角倍单宁倍酰葡萄糖,角倍单宁,鞣花酸,3,5二咖啡酰奎宁酸,Monogalloyl-glucose,3个未知成分.结论:研究首次发现角倍乙酸乙酯提取部位具有较强的EGFR抑制活性,IC50为5.528 μg·mL-1,Q-TOF-MS测定的相对分子质量及正离子信息鉴定表明角倍乙酸乙酯提取物中主要为单宁类成分,其中角倍单宁,鞣花酸,鞣花单宁为最主要成分.说明其含有的单宁类为抑制丁EGFR活性的主要成分,以期为其在抗癌方面的应用提供理论依据,同时为进一步跟踪分离活性成分奠定基础.
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