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目的：本课题组前期利用Bhas 42高通量细胞转化实验及软琼脂克隆形成实验发现黄酮类化合物芫花素具有潜在的非遗传毒性致癌性,本研究针对其可能的非遗传毒性致癌性作用机制深入研究.方法：本实验选取芫花素(0.5、1、5 μ g/mL)诱导Bhas 42细胞转化的三个浓度、H2O2 (25 μ M),同时设置DMSO阴性对照组平行开展实验.1)细胞的培养：用含15％FBS的MEM培养基复苏细胞,传代改用含5％FBS的DMEM/F12培养基培养.当细胞80％融合时,收集细胞并以3～5×103个/孔接种于96孔板.分别给予受试物作用24、48、72h.2)高通量筛选实验：受试物处理后分别采用Hochest33342/DCEH-DA、Hochest33342/Fluo4染色,培养箱中孵育30min,PBS清洗,5％的乙醇固定,采用In cell2000高内涵仪检测氧化应激、钙稳态.实验数据采用one-way ANOVA(双侧Dunnett-t检验)进行统计分析.