【摘 要】
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TGF-β1对大鼠皮肤成纤维细胞增殖具有双向调节作用,但是其调节机理仍不清楚.本研究采用siRNA沉默技术探讨Smad3在TGF-β1双向调节成纤维细胞增殖中的作用.实验发现利用p
【机 构】
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第三军医大学大坪医院野战外科研究所分子生物学中心,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室
【出 处】
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第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛
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TGF-β1对大鼠皮肤成纤维细胞增殖具有双向调节作用,但是其调节机理仍不清楚.本研究采用siRNA沉默技术探讨Smad3在TGF-β1双向调节成纤维细胞增殖中的作用.实验发现利用pSUPER构建的大鼠Smad3基因沉默质粒对原代成纤维细胞转染效率为41.2％,、并可使Smad3mRNA表达下调50％(定量PCR)、蛋白表达明显降低(免疫组化法).BrdU ELISA法显示其瞬时转染后具有促增殖作用且与转染剂量成正比,且对大TGF-β1的抑制细胞增殖和小剂量的促进细胞增殖均表现为抑制,同时,EMSA法检测发现Smad3 siRNA对大、小剂量TGF-β1的双向调节Smad3结合活性作用也有相似的抑制作用.
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