【摘 要】
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为了建立一种能够同时快速检测猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV2)和猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type3,PCV3)的双重PCR方法,参考GenBank中PCV2和PCV3基因
【机 构】
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河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002;郑州市猪重大疫病防控重点实验室,河南郑州450002河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002
【出 处】
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中国微生物学会第十六届全国微生物学教学和科研及成果产业化研讨会
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为了建立一种能够同时快速检测猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type2,PCV2)和猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type3,PCV3)的双重PCR方法,参考GenBank中PCV2和PCV3基因组序列,设计并合成了2对合适的特异性引物,建立PCV2和PCV3单项PCR扩增方法,并通过对双重PCR条件的优化,建立能够同时检测PCV2和PCV3的双重PCR检测方法,即利用一次PCR反应,能同时扩增出476bp(PCV2)和270bp(PCV3)两条特异性片段,而对猪伪狂犬病毒、猪细小病毒、猪流行性腹泻病毒、猪博卡病毒、沙门氏菌、大肠杆菌核酸扩增均为阴性;PCV2和PCV3的最低检测量分别为8000拷贝/μL和332拷贝/μL.本研究建立的双重PCR方法具有敏感性高、特异性强、重复性好,该方法适合对PCV2和PCV3的鉴别诊断和联合检测.
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