论文部分内容阅读
参考GenBank已收录的ZJ1株GPMV基因组序列，设计合成2对特异性引物，经RT-PCR技术扩增出大小为1 095 bp的M基因和1 470 bp的NP基因。将M、NP基因克隆到pET-28a表达载体中，构建了表达质粒pET-M、pET-NP，将表达质粒转化入大肠杆菌BL21(DE 3)，用IPTG进行诱导表达，并在不同的诱导时间收集菌液。经SDS-PAGE和Westem blot鉴定分析：以终浓度为1.0mmoL/L IPTG进行诱导4 h时M蛋白表达量最高，表达产物占菌体蛋白含量的29.9％，大小为39.7 ku；诱导3 h时NP蛋白表达可达到高峰，占整个菌体蛋白含量的26.7％，大小为53.2 Ku，两者均具有良好的抗原性。