NADase细菌毒素的活性测定

来源 :全国首届生物毒素学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhougang1020
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旨在建立一种测定NADase细菌毒素活性的非放射性测定法。该方法建立了一个NAD(辅酶I)依赖的显色系统,在该系统中,NAD接受乳酸脱氢酶(LDH)从乳酸脱下来的氢,再通过PMS(吩嗪二甲酯硫酸盐)传递给INT(碘化硝基四氮唑蓝),使后者还原而显色。如果NADase毒素分解NAD,就会打断递氢链而抑制显色反应。结果:显色系统中,NAD含量与显色有良好线性关系(R=O.9898)。绿脓杆菌外毒素A分解NAD而抑制显色反应。以毒素含量为自变量,以毒素对显色反应的抑制为应变量,建立了对数线性回归方程y=12.5x<0.26>当y=50℅时[即显色系统中的NAD有半数(250ng)被分解],x=207(ng)。定义分解1ng NAD的毒素活性为一个单位,则207ng毒素含有250个毒素活性单位。该方法的测定敏感性达到“ng”水平,表明该文建立的方法是一种敏感的测定NADase细菌毒素活性的非放射性测定方法。
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