【摘 要】
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目的：研究大肠杆菌植酸酶appA基因在pET32a(+)中的融合表达,获得活性高、耐热性强的植酸酶。 方法：提取大肠杆菌(SUGL)基因组DNA,通过PCR方法从基因组扩增得到植酸酶基因app
【机 构】
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四川大学生物资源与生态环境教育部重点实验室 四川省生物信息与代谢工程共享实验平台,四川成都 610000
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目的：研究大肠杆菌植酸酶appA基因在pET32a(+)中的融合表达,获得活性高、耐热性强的植酸酶。
方法：提取大肠杆菌(SUGL)基因组DNA,通过PCR方法从基因组扩增得到植酸酶基因appA,测序结果表明该基因的ORF读框包含1299个核苷酸。将该基因重组于大肠杆菌表达载体pET-32a(+)中,导入大肠杆菌BL21(DE3)中,构建工程菌BL21(DE3)-pET32a-appA。对表达条件进行了优化,在30℃下,以0.1mmol/L IPTG浓度诱导表达植酸酶,表达量达到10％以上。在37℃,用钒钼酸铵法测定了表达的植酸酶活性为40740.7U/g,同时观察不同加热温度对植酸酶活性的影响程度。
结论：融合表达的植酸酶的耐热性得到提高。
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