【摘 要】
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副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种人渔共患、可引起人食物中毒的重要病原微生物,在牡蛎(Concha Ostreae)等滤食性贝类中含量很高.本研究以副溶血弧茵毒素调控基因(
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副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种人渔共患、可引起人食物中毒的重要病原微生物,在牡蛎(Concha Ostreae)等滤食性贝类中含量很高.本研究以副溶血弧茵毒素调控基因(the toxin regulations,toxR)作为靶标基因,设计特异性引物及TaqMan探针,建立了牡蛎中副溶血弧菌的荧光定量PCR检测方法.特异性检测结果显示只有副溶血弧菌产生荧光信号,其他16株非副溶血弧菌未产生荧光信号,表明该方法特异性好.以含toxR基因的质粒为模板,建立了质粒拷贝数与CT值的标准曲线,分别采用含toxR基因质粒、纯培养的副溶血弧菌和添加副溶血弧菌的牡蛎模拟样品进行灵敏度试验,结果表明,其灵敏度分别为15copies、18cfu/mL和180cfu/mL.同一个样品的30次重复性试验表明试验内及试验间的变异系数分别为0.95％和1.5％,表明该方法重复性好.水温高时，副溶血弧菌含量高。试验结果表明，本研究建立的副溶血弧菌荧光定量PCR检测方法特异性好、灵敏度高、重复性好、耗时短，可用于牡虾等水产品中副溶血弧菌的定量检测，对海水养殖中副溶血弧菌污染普查及其含量监测具有重要意义。
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