【摘 要】
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采用差速和蔗糖不连续密度梯度离心纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)免疫Balb/C小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按常规方法进行细胞融合,经间接ELISA筛选,获得三株稳定分
【机 构】
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福建省农业科学院畜牧兽医研究所,福州,福建,350013
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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采用差速和蔗糖不连续密度梯度离心纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)免疫Balb/C小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按常规方法进行细胞融合,经间接ELISA筛选,获得三株稳定分泌抗PRRSV单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,命名为A61、B47和C65.三株单抗的亚级份分别为IgG1、IgG3和IgG1,均具有ELISA、IFA和Western blot特性,细胞上清液和腹水的ELISA抗体效价分别为26～28和105～106.IFA测定表明A61和B47可与PRRSV-FZ和PRRSV-V2332反应,不与PRRSV-FJ-1反应；而C65与供试的三株PRRSV均呈免疫荧光阳性。特异性测定表明三株单抗与Marc-145细胞、猪2型圆环病毒和猪细小病毒均无交叉反应。Western blot测定表明三株单抗均能识别PRRSV-GP5蛋白。上述结果表明三株单抗均能特异性地识别PRRSV毒株,为PRRS免疫诊断试剂盒的研制奠定基础。
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