N-CWS-PG的分离鉴定及抑瘤实验研究

• 作 者: 饶桂强 潘梅萍 何伟 谢必峰
• 机 构: 福建师范大学生命科学学院,福州350108
• 出 处: 华东六省一市生物化学与分子生物学会2015年学术交流会
• 发表日期: 2015年12期
• 关键词: 肽聚糖 红色诺卡氏菌细胞壁骨架 分离鉴定 抑瘤作用 免疫调节

N-CWS即红色诺卡氏菌细胞壁骨架,是一种免疫调节剂,国内已获准生产该免疫调节剂作为抗肿瘤的药品.张祝兰等通过研究分析得出N-CWS是由三类主要的成分构成,即类脂、多糖、肽聚糖,通过国内外的文献检索表明肽聚糖PG具有激活免疫功能的作用.因此,本文对N-CWS中的肽聚糖单体N-CWS-PG进行分离鉴定,并进一步通过研究其动物抑瘤试验,探讨其对机体的免疫调节作用.
目的:初步探究N-CWS-PG经过酶解过后对小鼠机体的抑瘤作用.
内容:
1.N-CWS-PG制备:培养收集的红色诺卡氏菌菌体，通过超声波法破碎获得该菌细胞壁，经过酶解、有机溶剂提取，去除色素获得细胞壁骨架N-CWS，再经过去脂、酸解、离心、干燥，获得浅黄色的水不溶性肽聚糖N-CWS-PG。
2.N-CWS-PG纯度鉴定:(1)对实验得到的N-CWS-PG进行溶菌酶实验，发现在溶菌酶作用72h左右，N-CWS-PG大颗粒水解为乳白色悬液，初步验证为肽聚糖。(2)对该提取物进行氨基酸分析，其所含的氨基酸种类与肽聚糖基本一致。因而，证实本提取目标物为肽聚糖(N-CWS-PG)。(3)对所获得的肽聚糖单体进行蛋白质含量、总糖含量、氨基己糖含量、总脂含量的测定等纯度验证实验。
3.N-CWS-PG抑瘤实验:对实验获得的N-CWS-PG进行溶菌酶水解，然后分别进行体外血清学实验和小鼠皮下注射抑瘤实验。结果体外血清学证实N-CWS-PG具有抑制肿瘤细胞增殖的作用;小鼠抑瘤实验显示其有比较好的抑瘤效果。
结论:基于以上的实验结果表明，N-CWS-PG确实有一定的抑瘤效果。因此，可以通过分离获得N-CWS-PG有可能作为抗肿瘤的免疫制剂。