【摘 要】
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本研究构建了Pyrolysin的系列突变体，对其加工成熟、N端前肤及C端延伸区的功能进行了研究。结果表明，Pyrolysin在高温下由酶原Pls加工转变为成熟酶mPls，成熟酶的产生需要切
【机 构】
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武汉大学生命科学学院,武汉430072
【出 处】
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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会
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本研究构建了Pyrolysin的系列突变体，对其加工成熟、N端前肤及C端延伸区的功能进行了研究。结果表明，Pyrolysin在高温下由酶原Pls加工转变为成熟酶mPls，成熟酶的产生需要切除N端前肽和C端前肽。除了作为分子伴侣，N端前肽还是成熟酶的抑制剂，在被降解之前通过抑制成熟酶的活性以提高成熟效率。缺失C端199 as的突变体Pls} C199可以加工形成成熟酶mP1s0 C199，其分子量大小和活性与mPls类似，但稳定性略低，说明C端前肚不直接参与酶原的成熟，但对成熟酶的热稳定性有一定影响。此外，与mPls相比，缺失C端延伸区的成熟酶mPls△C740在活性和稳定性等方面都有明显降低，但二者的底物特异性差异不明显。许多极端嗜热古菌蛋白酶具有长的C端延伸区，本研究结果有助于深入理解这类酶耐受极端高温条件的分子机制。
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