【摘 要】
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大肠埃希氏菌(又名大肠杆菌)常见于自然环境中,也是动物消化道的常住菌,属革兰氏阴性中等大小的杆菌.有些血清型的大肠杆菌具有致病性,有些不具有致病性,已有研究资料表明,大肠杆菌iss基因(increased serum resistance gene)的存在与否是判定大肠杆菌致病性的重要依据之一.因此,深入研究大肠杆菌iss基因与其致病力的关系对科学防治本病具有重要的指导意义.本研究分别采用套式PC
【机 构】
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东北农业大学动物医学学院,黑龙江哈尔滨,150030
【出 处】
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2016第六届中国兽药大会(中国畜牧兽医学会动物药品学分会第五届全国会员代表大会暨2016学术年会、中国微生物学会兽医微
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大肠埃希氏菌(又名大肠杆菌)常见于自然环境中,也是动物消化道的常住菌,属革兰氏阴性中等大小的杆菌.有些血清型的大肠杆菌具有致病性,有些不具有致病性,已有研究资料表明,大肠杆菌iss基因(increased serum resistance gene)的存在与否是判定大肠杆菌致病性的重要依据之一.因此,深入研究大肠杆菌iss基因与其致病力的关系对科学防治本病具有重要的指导意义.本研究分别采用套式PCR和real-time PCR方法对72株鸡源大肠杆菌进行了iss基因检测,检测结果显示,利用套式PCR方法检测出69株鸡源大肠杆菌具有iss基因,3株未检测出iss基因,经real-time PCR方法复检,证实该3株菌也含有iss基因.上述实验结果表明,iss基因在大肠杆菌中普遍存在,而其转录水平存在差异.将69株大肠杆菌iss基因进行测序比对分析,共发现16种核苷酸序列,命名为type1-16及10种氨基酸序列,命名为form1-10.经过比对发现,不同序列之间的差异较小,基因突变的位置较为固定,且多数氨基酸序列未发生改变,表明该基因具有高度保守性.进化树分析结果显示,16种核苷酸序列的进化树分为2个主干,其中type15、16型菌株位于同一分支,type1-14型菌株位于同一大分支.氨基酸序列分析结果显示,进化树主要分为2个大分支,其中form3、5序列菌株位于同一分支,其他序列菌株位于另一分支.随机选取30株大肠杆菌分别接种雏鸡进行致病性研究,并经real-time PCR方法检测30株大肠杆菌iss基因的转录水平,结果显示,大肠杆菌iss基因拷贝数与其毒力成正相关,同时iss基因拷贝数、毒力及血清抗性三者两两之间呈正相关,表明大肠杆菌iss基因的转录水平越高,其对于血清的抵抗能力越强,致病力也越强.综上,本研究结果显示,iss基因在大肠杆菌中广泛存在,与大肠杆菌致病力存在相关性,即iss基因转录水平越高,菌株的毒力越强,同时与血清抗性呈正相关.研究结果为大肠杆菌致病性相关因素的深入研究提供了基础.
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