茶树中性/碱性转化酶基因CsINV10的克隆与表达分析

来源 :长三角“物联网与现代农业”研究生学术论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pjpdl6123475
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  从课题组前期对茶树冷驯化进行的转录组测序结果中挑选出6条与中性/碱性转化酶基因高度相似的EST序列进行了电子拼接和RT-PCR验证,获得一条全长为2101bp的核酸序列.其包含1923 bp的ORF,编码640个氨基酸,蛋白分子量为71.8 kD,理论等电点(pI)为5.69.BlastX同源性比对显示该基因与荔枝LcNI相似性最高(80%),而系统进化树分析显示该基因编码的氨基酸序列与木薯MeNINV8亲缘关系最近,因而认为该基因为中性/碱性转化酶基因,属于G100家族成员,将其命名为:CsINV10(GenBank number:KT359348).对CsINV10的氨基酸序列做进一步生物信息学分析发现,CsINV10的氨基酸序列无N端信号肽,无跨膜结构域,属于亲水性蛋白,并定位在叶绿体上.荧光定量PCR分析表明,CsINV10具有组织表达特异性,在茶树叶和花中的表达量最高,根系最低.对CsINV10ee℃)、干旱和盐胁迫条件下,茶树成熟叶片中CsINV10的表达量在处理1d后都呈逐渐上升趋势;而在ABAe5 d后基本不表达,表明该基因可能参与了茶树对多种逆境胁迫的响应,这为后续进一步研究转化酶基因在茶树抗寒等逆境胁迫中的作用奠定基础.
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