运动性贫血及营养干预对大鼠血清EPO、肾脏与肝脏EPO和骨骼EPOR基因表达的影响

来源 :2010年中国运动生理生化学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:blueskyxq
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  目的:通过对长期递增负荷跑台运动大鼠指标测试,从血清EPO水平、肾脏与肝脏EPO水平及骨髓EPOR基因表达水平进行研究,探讨大鼠在运动性贫血状态和两种营养剂补充时这些指标水平的变化是否与血象指标存在着相关关系,进而对运动性贫血机理与防治措施提供实验依据.方法:雄性Wistar大鼠32只,体重200±15克,随机、筛选分为对照组(8只)和递增负荷跑台建模组(简称建模组,24只);在运动性贫血模型建立后,贫血大鼠随机、筛选分为3组:递增负荷跑台运动组(简称运动组,8只)、递增负荷跑台运动+补充铁制剂组(简称运动+补铁组,8只)、递增负荷跑台运动+补充中药制剂组(简称运动+阿胶组,8只).参考赵杰修等建立的运动性贫血动物模型,运动组、运动+补铁组、运动+阿胶组进行递增负荷跑台训练(BCPT-202型)9周,动物跑台坡度为0,跑台速度为30米/分钟,每周训练6天,前2周每天进行1次训练,其余时间为每天早、晚各一次,每周休息一天.前5周运动性贫血模型建立时的训练安排计划为:第一次训练时间为1分钟,以2分钟/天的频率递增,最后一次的训练时间为95分钟;后4周营养补充时训练计划安排为:每天2次时间相同的训练,前两周运动时间固定为80分钟/次和85分钟/次,后2周以90分钟起,2分钟/天的频率递增,最后一次的训练时间为114分钟.在运动性贫血模型建立后(第5周结束时)进行营养补充,每日训练结束后进行灌胃.铁制剂是乳酸亚铁口服液,乳酸亚铁(以Fe计)含量是0.2mg-0.3mg/ml,维生素C含量是2mg-3mg/ml;中药制剂是复方阿胶浆口服液,主要成分是阿胶、红参、熟地黄、党参、山楂,辅料是蔗糖.实验大鼠在建模期最后一次训练、营养干预期最后一次训练结束24小时左右,断尾取血5μl,用红细胞分析仪测定Hb、RBC、Hct等指标.在末次训练结束后的24小时左右用戊巴比妥钠(2%)注射麻醉实验大鼠,腹腔主动脉取血入离心管,370C水浴30分钟,3000转\分速度离心20分钟,EP管分装血清,-20℃冷冻保存,待用.-20℃冷冻保存的大鼠血清恢复至室温后于Wellscan K3KHb酶标仪进行同批测定.促红细胞生成素(EPO)的测试采用美国LIFEKEY的血清专用ELISA试剂盒(LIFEKEY Biomeditech Corporation,New Jersey).肾脏与肝脏EPO指标测定方法为酶联免疫吸附法(ELISA),应用美国LIFEKEY组织匀浆液专用科研试剂盒(LIFEKEY Biomeditech Corporation,New Jersey).骨髓EPOR指标观察基因表达水平.实验数据采用SPSS统计学软件包进行one-way ANOVA检验,显著性水平为P<0.05,非常显著性水平为P<0.01.结果:递增负荷跑台运动组、运动+补铁组、运动+阿胶组和对照组比较,运动组Hb、RBC、Hct指标低于对照组,表现出非常显著性差异(P<0.01),运动+补铁组、运动+阿胶组和对照组比较没有显著性差异.营养干预期大鼠血清EPO指标水平变化较小,三组之间并无任何显著性差异(P>0.05).另外,肾脏和肝脏EPO指标水平也同样表现出对照组、运动组、运动+补铁组、运动+阿胶组四组之间并无显著性差异的规律(P>0.05).营养干预期大鼠骨骼EPOR与贫血判定三项指标(Hb、RBC、HCT)表现出显著性相关(分别为r=0.545,r=0.689,r=0.543),且显著性水平均达到非常显著性(P<0.01),血清EPO、肾脏EPO和肝脏EPO水平未表现出与Hb、RBC、HCT的显著性相关,提示EPOR基因表达水平的下降可能是运动性贫血发生时的发生机理之一.结论:骨髓EPOR基因表达水平的下降可能是限制机体血红蛋白、红细胞生成的重要途径,而与机体血清、肝脏、肾脏EPO活性水平下降并无实验支持.
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