人退变椎间盘髓核细胞的培养及生物学性状分析

来源 :2010广东省医学会骨科年会暨岭南骨科学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kollisjordan
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  目的 建立退行性变椎间盘细胞的模型,观察培养细胞的形态学特点、超微结构及细胞外基质分泌情况,为选择适宜的干预时机防止髓核细胞退变提供一定实验依据。方法 分离、培养人退变椎间盘髓核细胞,通过对不同代次髓核细胞采用光镜、电镜等形态学方法进行大体形态和超微结构观察,采用生长曲线和XTT实验研究不同代次细胞间的生长动力学差异,测定髓核细胞的活力和细胞Ⅱ型胶原和糖胺多糖的mRNA表达。结果 传2代之前的细胞形态饱满,胞浆丰富,细胞呈多角形、短梭形,折光性强,并且电镜下细胞内细胞器丰富,形态正常,线粒体含量少,核糖体含量多,说明细胞代谢旺盛,增殖能力强,生长曲线和XTT实验吸光度值等细胞生长动力学指标比较也提示传2代之前的髓核细胞活性高,增殖能力强,细胞活力高,细胞外基质分泌旺盛。从传3代起,部分细胞的形态逐渐向长梭形演化,逐渐表现为成纤维细胞的形态,说明细胞开始出现"返祖"现象,也称为老化现象,细胞的生长趋缓,传4、5代后细胞均表现为长梭形。电镜下粗面内质网扩张,线粒体增多,生长处于停滞状态,失去增殖能力。细胞活力降低,细胞外基质明显减少。
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