【摘 要】
：
以猪A组轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,扩增了981bp的Vp7基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-TVector中,构建出克隆质粒pGEM-T-V
【机 构】
：
吉林农业大学动物科学与技术学院,预防兽医学,长春,130118
【出 处】
：
中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会
论文部分内容阅读
以猪A组轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,扩增了981bp的Vp7基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-TVector中,构建出克隆质粒pGEM-T-Vp7.同时以SacⅠ和KpnⅠ分别双酶切pGEM-T-Vp7和以胸苷酸合成酶基因(thymidylatesynthase,thyA)为选择压力的非抗生素抗性的可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的质粒载体pW425t,并将纯化的Vp7基因亚克隆至表达载体pW425t中,构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425t-Vp7.将pW425t-Vp7转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态E.coliX51中,经生长功能弥补筛选阳性克隆,通过SDS-PAGE分析,可见约37.07kD蛋白的,约占菌体总蛋白的15﹪.由Westernblot分析,表明该蛋白具有与轮状病毒多克隆抗体的反应原性,从而为重组载体pW425t-Vp7在乳酸菌受体菌株中表达提供理论基础和依据.
其他文献
目的探讨关节镜治疗距下关节创伤性关节炎的临床疗效。方法回顾分析2011年1月—2014年12月收治并符合选择标准的14例距下关节创伤性关节炎患者临床资料。患者均为男性;年龄32
以PCV1的Rep基因的mRNA为靶序列,设计合成了3个siRNA,并构建了各自的表达质粒;构建了Rep基因与EGFP融合的真核表达质粒(pCDPCV1ORF1-EGFP),并实现了二者在PK-15细胞中的融合
用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从猪A组轮状病毒总RNA中扩增了2332bp的VP4全基因.通过T4DNA连接酶将其直接连接于克隆质粒载体pGEM-T-easy中,转化至受体菌JM109中,质粒
本文综述了2005年和2006年国内外丙烯酸行业的发展概况,主要是新的产能增加概况、新技术的进展概况和中国丙烯酸及酯产品的进出口概况.
基于某反坦克导弹总体设计方案,在导弹前部加入推力矢量控制(TVC)装置,以实现导弹在弹道末端折转击顶.进行了导弹从直升机和地面发射、弹道折转、攻击多运动方式装甲目标的数
研究了升力体航天器再入大气层的弹道优化设计问题,提出了过载约束条件下再入弹道的优化设计思路,给出了最优弹道随高度变化的绕速度轴滚转角大小的计算方法.算例表明,无论从
目的 比较SuperPATH入路与传统Hardinge入路行人工全髋关节置换术(total hip arthroplasty,THA)的早期临床疗效.方法 将2015年5月-2016年3月收治的154例(173髋)符合选择标准
以猪A组轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,扩增了1194bp的Vp6基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-TVector中,构建出克隆质粒pGEM-T-
一、草坪病害1.褐斑病褐斑病在持续高温和高湿时期可能突然发生亚重的危害。这种真菌从中心点呈圆形向外蔓延,达几厘米或几十厘米。在这个范围内的草叶最后变成褐色。褐色斑
为了估算高超声速类乘波体飞行器的气动力,以三角形面元逼近飞行器外形,根据迎/背风面情况分别采用达黑姆-巴克法、普朗特-迈耶耳法、切锥法和膨胀波方法计算无粘气动力;通过