中华鲟基因SYBR Green实时荧光PCR检测方法的建立

来源 :2011食品安全技术与标准国际研讨会暨AOAC中国区年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wp76155900
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  根据NCBI上已公布的中华鲟D-loop基因、细胞色素b基因、12S rRNA基因的核酸序列设计出四对引物对,经SYBR Green实时荧光PCR反应、熔解曲线分析和扩增片段克隆测序后,发现针对D-loop基因的F2-R1引物能够高效、特异地实现对靶序列扩增,选择其作为中华鲟基因特异性扩增引物,建立中华鲟基因SYBR Green实时荧光PCR检测方法。所建立的中华鲟D-loop基因SYBR Green实时荧光PCR检测方法特异性好、可操作性强,具有较好的应用价值,能够为我国中华鲟研究与保护提供较好的技术手段。
其他文献
This study aims to evaluate the effects of spices essential oils (SEO) on the microbial populations in chilled pork stored in PE film antimicrobial package. The microbiota from the pork under differen
@@ The qualitative event-specific PCR detection method of genetically modified (GM) RT73 rapeseed was developed based on the cloned 3 end flanking sequence of RT73 rapeseed integration before the coll
会议
Diarrheagenic Escherichia coli strains have emerged as foodborne pathogens of worldwide public health importance. In this study, a one-shot multiplex PCR (mPCR) was developed for simultaneous detectio
Chicken were immunized via intranasal with inactivated avian H5N2 influenza virus and adjuvant CpG(CpG adjuvant group) or rIL-2(IL adjuvant group). The results showed that the number of IELs in the tr
目的 用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型方法,分析辽宁丹东和广东珠海两地区从水体和水产品中分离的霍乱弧菌之间的相关性。方法 对39株霍乱弧菌用内切酶Notl酶切DNA后进行PFGE分子分型,并在0.5×TBE电泳缓冲液中加入终浓度为3.8mg/L的硫脲溶液电泳。结果 所有39株霍乱弧菌的基因组DNA显示出良好的分型结果,从朝方排污口、丹东鸭绿江水体中的鲫鱼、河蟹以及丹东排污口分离出的霍乱弧菌之间
从烟台近郊土壤中分离出一株单核缅胞增生李斯特菌拮抗微生物sly-3,利用传统分类学和分子生物学相结合的方法对其进行鉴定,并采用生物测定的方法评价其抑菌活性。菌株的形态学特征和生理生化特征与枯草芽孢杆菌基本一致,其16S rDNA序列与GenBark中已鉴定的枯草芽孢杆菌的16S rDNA序列同源性达99%以上,据此初步确定其为枯草芽孢杆菌。抑菌谱研究发现,该菌仅对革兰氏阳性菌有抑制作用,而对革兰氏
从进口水产品中分离到的菌株F5-11,通过VITEK 2 compact全自动微生物鉴定仪的分析,初步鉴定为副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)。根据副溶血弧菌的毒力基因(tlh和toxR)和保守基因(groEL、16S rDNA、GyrB和vpm)设计引物,进行PCR扩增,得到目的片段。通过气相色谱和质谱联用法(GC-MS)分析副溶血弧菌F5-11的全细胞脂肪酸,发现含有
建立了一种采用电化学阻抗免疫生物传感器快速检测沙门氏菌的方法。利用金纳米颗粒(NAuPs)、碳纳米管(CNT)、聚酰胺-胺(PAMAM)和壳聚糖(Chi)制备的复合材料修饰玻碳电极,用于抗沙门氏菌抗体分子(ASA)的固定,制备了一种新型的免疫生物传感器,成功的实现了对沙门氏菌的快速、灵敏的测定。以循环伏安法和电化学阻抗技术对修饰电极的制备进行了表征。实验结果表明新型复合材料促进了电极的电子传递、增
为建立快速准确的副溶血性弧菌的检测体系。本文根据滚环扩增方法的原理设计引物、锁式探针以及反应体系。试验证明了RCA检测体系具有很好的特异性、灵敏度和稳定性,适用于副溶血性弧菌的检测和鉴定。
本文以牛奶中的致病性无乳链球菌作为研究对象,对九种常用的细菌核酸提取方法进行比较,选用紫外分光光度计法和实时荧光PCR法对各方法进行系统评估。结果表明:超声波处理结合天根吸附柱的方法能提取到得率较高、纯度较好的DNA,结合实时荧光PCR法后对牛奶中无乳链球菌的检测灵敏度能达到90 CFU;天根吸附柱法提取所得DNA得率稍低,结合实时荧光PCR法后对牛奶中无乳链球菌的检测灵敏度也能达到90 CFU;