【摘 要】
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目的：制备针对人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ(TIMP-Ⅰ)融合蛋白的单克隆抗体.方法：用逆转录聚合酶链反应法从纤维化的肝组织中扩增TIMP-Ⅰ编码序列,产物克隆入pQE31载体,转化大肠杆
【机 构】
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解放军第三○二医院临检中心 北京 100039
【出 处】
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第18次全国干扰素及细胞因子学术会议
论文部分内容阅读
目的：制备针对人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ(TIMP-Ⅰ)融合蛋白的单克隆抗体.方法：用逆转录聚合酶链反应法从纤维化的肝组织中扩增TIMP-Ⅰ编码序列,产物克隆入pQE31载体,转化大肠杆菌BL21,诱导表达后通过6×His标签进行纯化,用纯化后的蛋白免疫Balb/c小鼠,采用常规的细胞融合技术制备针单克隆抗体,并对进行鉴定.结果：成功构建了TIMP-Ⅰ原核表达体系,并获得了重组蛋白.筛选出4株能稳定分泌抗TIMP-Ⅰ的单克隆抗体杂交瘤细胞株,免疫球蛋白类型有3株为IgG1类.Western Blot印迹显示这些单抗能特异结合TIMP-Ⅰ蛋白.结论：成功构建了人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ原核表述体系,并获得了单克隆抗体.
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