【摘 要】
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为弥补当前市场上盐酸克伦特罗(CLB)快检方法存在的缺陷,利用人工合成抗原免疫家兔以建立CLB酶联免疫吸附检测方法(ELISA)。首先采用正交试验设计,以重氮化反应将CLB和卵清白蛋
【机 构】
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天津大学化工学院生物化工系 系统生物工程教育部重点实验室,天津 300072 中国科学院 长春应用化学研究所,吉林 长春 130022
【出 处】
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全国第15届有机和精细化工中间体学术交流会
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为弥补当前市场上盐酸克伦特罗(CLB)快检方法存在的缺陷,利用人工合成抗原免疫家兔以建立CLB酶联免疫吸附检测方法(ELISA)。首先采用正交试验设计,以重氮化反应将CLB和卵清白蛋白OVA、牛血清白蛋白BSA偶联工艺进行优化,分析各因索对偶联反应的影响机理,并在得出的最佳条件下合成高偶联率的免疫抗原BSA-CLB和包被抗原OVA-CLB。
继而以BSA-CLB免疫日本人耳白家兔,以OVA-CLB包被酶标板,采用间接非竞争酶联免疫吸附实验检测血清效价,以鉴定合成抗原的生物学活性。结果表明,OVA-CLB和BSA-CLB的偶联率分别为29:1和52.3:1,获得的抗血清效价高达1:640000,ELISA检测灵敏度0.013μg/mL。
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