【摘 要】
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根据先前在云南地区分离的乙型脑炎病毒Yunnan0901株基因组核苷酸序列设计特异性引物,构建pMD18-T-JEV-E质粒作为模板进行SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,摸
【机 构】
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军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130122
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会第十二届学术研讨会
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根据先前在云南地区分离的乙型脑炎病毒Yunnan0901株基因组核苷酸序列设计特异性引物,构建pMD18-T-JEV-E质粒作为模板进行SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,摸索最佳反应体系条件,建立乙型脑炎病毒荧光定量PCR检测方法。建立的荧光定量PCR标准曲线呈现良好的重复性和特异性,与模板浓度呈现良好的线性关系。而且与猪瘟病毒、猪蓝耳病毒、猪圆环病毒、基孔肯雅病毒、辛德毕斯病毒核酸,均不发生非特异性扩增,具有良好的特异性。本实验建立了检测基因Ⅲ型乙型脑炎病毒的实时荧光定量PCR方法,具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可应用于临床检查工作为乙型脑炎病毒的监控提供技术支持。
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