I2R配体2BF对EAE小鼠淋巴细胞亚群的调节作用

来源 :华东地区神经电生理会议暨2010年浙江省医学会神经病学分会学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huangping118
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  目的 虽然本实验室已经证实咪唑啉-2受体(12R)特异性配体2BFI对小鼠多发性硬化模型实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的发生有保护作用,但是机制未明.本研究主要观察2BFI整体实验干预下对EAE小鼠中枢和外周的淋巴细胞亚群及相关细胞因子的变化,从而探讨2BFI对EAE干预作用的细胞免疫学机制.方法与内容 SPF级C57BL/6小鼠:雌性,6-8周龄,体重14~16g.用MOG35-55免疫C57BL/6小鼠制作EAE模型,将小鼠随机分为3组:CFA对照组(CFA-control group),EAE模型对照(EAE-control group)组,2BFI药物干预组(EAE-2BFI 20 mg·kg1group).EAE对照组2BFI干预组小鼠用MOG35-55混合CFA制成抗原乳剂皮内注射,CFA对照组以生理盐水代替抗原肽制备抗原乳剂皮内注射,0、48小时腹腔注射PT造模.2BFI干预组于免疫当天开始腹腔注射给药,每天两次,连续14天.CFA对照组和EAE对照组组腹腔注射生理盐水(NS)代替.自免疫当日定为第0天,每日两次观察并记录动物行为学及体重的变化.采用量化评分法,比较不同组别的EAE发病率、潜伏期、症状评分.CFA对照组于20天处死,其他各组动物于发病高峰期处死.取神经组织(腰髓)用多聚甲醛固定,行HE染色观察评价组织炎症病理变化;用流式细胞检测术(FCM)分析中枢神经系统(CNS)及脾脏CD4+T、CD8+T、CD4+TCD25+Treg、Bcell及CD39的变化.用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)法测定小鼠大脑干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白介素-10(interleukin-10,IL-10)和转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)mRNA的表达.
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