新型双功能分离介质对还原变性溶菌酶折叠研究

• 作 者: 王军;毕晶;白泉;
• 机 构: 西北大学 现代分离科学研究所/现代分离科学陕西省重点实验室,西北大学 合成与天然功能分子化学教育部重点实验室,陕西 西安 710069
• 出 处: 第三届中国中西部地区色谱学术交流会
• 发表日期: 2010年期

目的:采用同时具有离子交换和疏水功能的新型双功能分离介质，分别在弱阳离子交换色谱和疏水色谱两种模式下对还原变性的溶菌酶折叠进行了研究。
方法:详细讨论了在两种分离模式下流动相中脲浓度，GSH/GSSG比例，pH，蛋白浓度及流动相流速对还原变性溶菌酶复性效率的影响。
结果:使用此双功能分离介质，可分别在WCX和HIC模式下实现对还原变形溶菌酶的复性。在WCX模式下复性时，在蛋白浓度高达40 mg/mL的条件下，活性回收率和质量回收率分别为94.6％和96.0％，而在HIC模式下，蛋白浓度为5 mg/mL时，相应的活性回收率和质量回收率分别为79.8％和96.1％。
结论:表明该新型双功能分离介质作为新型的蛋白折叠色谱固定相，利用一根色谱就可在wcx和HIC模式下对变性蛋白进行折叠。