【摘 要】
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目的:用疏水色谱法对还原变性核糖核酸酶复性规律进行研究。 方法:考察了疏水色谱流动相含脲浓度、氧化还原比例及蛋白浓度对还原脲变和胍变核糖核酸酶复性效率影响。
【机 构】
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西北大学 现代分离科学研究所/现代分离科学陕西省重点实验室/西北大学合成与天然功能分子化学教育部重点实验室,陕西 西安 710069
【出 处】
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第三届中国中西部地区色谱学术交流会
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目的:用疏水色谱法对还原变性核糖核酸酶复性规律进行研究。
方法:考察了疏水色谱流动相含脲浓度、氧化还原比例及蛋白浓度对还原脲变和胍变核糖核酸酶复性效率影响。
结果:流动相中添加2.0 mol/L的脲，不仅可以有效抑制变性蛋白的聚集沉淀。还可提高其复性效率和质量回收率。弱碱性的流动相和一定比例的GSH/GSSG有利于还原变性RNase A二硫键的正确对接。在对各因素进行优化后，在最佳条件下，HIC对还原变性RNase A能完全复性，还原脲变RNase A的活性回收率和质量回收率分别为98.0％和61.9％，而还原胍变分别为100.1％和66.8％。
结论:表明PFLC是蛋白折叠研究的有力工具。
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