【摘 要】
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目的:研究参附注射液(SFI)改善大鼠心肌肥大的microRNA调控机制. 方法:健康SD大鼠行腹主动脉缩窄(AAC)术建立心肌肥大模型,动物分成3组:SFI组(6.0raL·kg-1·d-1)、model
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目的:研究参附注射液(SFI)改善大鼠心肌肥大的microRNA调控机制.
方法:健康SD大鼠行腹主动脉缩窄(AAC)术建立心肌肥大模型,动物分成3组:SFI组(6.0raL·kg-1·d-1)、model组(6.0mL·kg-1·d-1)和Sham组(6.0mL·kg-1·d-1),腹腔注射,连续12周.造模成功大鼠心肌作microRNA(miR)基因芯片筛选有显著差异表达的miRs,Real-time RT-PCR方法检测确认候选miR.利用生物信息学方法分析候选miR的候选靶基因,并用RT-PCR与Western blot方法检测靶基因mRNA及其靶蛋白表达水平.在苯肾上腺素(PE)刺激建立的培养乳鼠心肌细胞肥大模型,分别给予SFI,候选miR模拟物miR-mimic和抑制剂miR-inhibitor后,检测心肌细胞表面积,候选靶基因和靶蛋白表达的变化.
结果:model组大鼠HW/BW及LVW/BW显著高于Sham组和SFI组(P＜0.01);而SFI组HW/BW及LVW/BW与Sham组相比无显著差异;基因芯片筛选结果显示,model组与SFI组相比共有23种miRs差异表达显著,其中下调的有miR-181d-5p等13种;MHC mRNA及MHC蛋白在model组大鼠心肌中过表达,而在SFI组中的表达与Sham组接近.SFI上调PE刺激的心肌细胞miR-181d-5p水平,抑制PE刺激所致心肌细胞表面积增大;miR-181d-5p-mimic能抑制心肌细胞MHC蛋白表达,抑制细胞表面积增大,而miR-181 d-5p-inhibitor的作用结果相反.
结论:microRNA-181d-5p具有抑制心肌肥大的作用,SFI可能通过上调或维持miR-181d-5p的表达从而降低MHCmRNA与MHC蛋白的表达,抑制腹主动脉缩窄大鼠心肌肥大,从而改善大鼠心功能,对心肌肥大产生治疗作用.
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